Объемная двойка: Мастер-класс по изготовлению объемной цифры из картона. — 46 ответов на Babyblog

09.02.202007.06.2021

Содержание

Мастер-класс по изготовлению объемной цифры из картона. — 46 ответов на Babyblog

Искала на просторах ББ мастер-классы по изготовлению объемной цифры — не нашла. Решила проявить свою смекалку и сделала фоторассказ о том, как мои руки мастерили.

Для тех у кого скоро праздник, и необходима атрибутика. Вперед под кат.

п.с. У меня это каркас, сверху этого каркаса будут еще украшения, но они в процессе изготовления. Вариантов украшения сверху масса. Важно мне было, что эта цифра имеет объем, и она не плоская. Конечный вариант будет обязательно показан, но позже. А сейчас о каркасе.

Итак нам необходимо:

коробка не нужная (как в моем случае), или гофрокартон.

ножницы побольше

Карандаш и ластик

скотч малярный (мне было с ним удобнее, тк его не надо отрезать, а можно отрывать, скотч прозрачный не особо хорошо держится на картоне, поэтому если сверху вы будете что.то клеить, то лучше обклеить после изготовления каркас бумагой. )

И все равно мне позже пришлось сверху каркас обклеить прозрачным скотчем, тк малярный скотч все таки отклеивается от картона, точно так же как и прозрачный не особо хочет держаться на картоне, но если в несколько слоев, то все замечательно держится.

Итак приступим.

Берем коробку, раскладываем ее или наоборот складываем до плоского состояния. Тогда у нас получается, что при вырезании будет сразу 2 цифры.

И рисуем карандашом нужную нам цифру.

Далее начинаем процесс вырезания. Легче все пойдет, если край, отрезанный вы будете по мере отрезания загибать в сторону от руки вниз, иначе сложнее продвигаться и разрезать. Можно воспользоваться канцелярским ножом, но тогда необходимо под картон что-то положить, типа большой доски, например.

Далее я брала все обрезки, оставшиеся от коробки, после вырезания двойки, и отмерила необходимую ширину, которая мне необходима у двойки.

Отмерила, взяла линейку, отметила точками с двух сторон нужное количество сантиметров и с помощью крышки (тк она длинная, и можно сразу нарисовать от точки до точки).

Начинаем обклеивать по краям нашими вырезками и делать бочка у нашей двойки.

Получаются вот такие бортики. В чем плюс гофрокартона, изгибы делаются очень легко, и так же легко эти изгибы удерживаются картоном, поэтому клеить бортик изогнутый из гофрокартона легче, на мой взгляд.

Когда все бортики приклеены к одной из сторон цифры, мы берем вторую сторону и приклеиваем к нашим бортикам.

Как своими руками сделать цифру из салфеток за пару часов

Для детского дня рождения, фотосессии нужен реквизит. Цифры из салфеток приобрели популярность, их можно увидеть на детских днях рождения. Действительно, такого рода украшения на празднике – вне конкуренции. Они лёгкие, и дети могут с ними поиграть, недорогие, красивые и вызывают лишь приятные эмоции.

Оригинальная композиция из салфеток в виде цифры требует творческого подхода. Хотя их изготовление занимает не один час, эмоции счастливого именинника, получившего такую цифру, окупают все затраты времени и сил.

Посмотрите, как сделать цифру, как её украсить, какие материалы нужны, и попробуйте сделать декор из салфеток своими руками по нашим мастер-классам.

Какие материалы нужны для работы

Для праздничной композиции берут однотонные салфетки без рисунка. Естественно, чем больше фигура, тем больше понадобится на неё материала. Одной пачки мало, берите сразу несколько упаковок по 100–200 салфеток. Чем пышней декор, тем лучше выглядят цифры из салфеток. Фото в примере.

Чем больше элементов, тем пышнее объем

Но салфетки — не самое важное. Нужна еще заготовка из картона или пенопласта. Реже встречаются деревянные цифры, но их не декорируют салфетками, а красят.

Под заготовку можно использовать пустые коробки, транспортировочную упаковку от бытовой техники. Те материалы, что часто отправляют в мусор.

Существуют готовые макеты объемных цифр из бумаги, которые нужно, распечатать, вырезать и соединить. Техника создания таких фигур называется паперкрафт.

Из упаковки от продуктов получаются небольшие цифры. Пакеты из-под сока или молока обрезаются и вставляются один в другой. Поверхность маскируется папье-маше — наклеенным слоем жатой бумаги. Берите для оклейки клей ПВА с густой консистенцией. Будет обидно, если картон разбухнет и расплывётся. Или выбирайте упаковку с фольгированой поверхностью, к примеру, коробку из-под сока.

С картоном придётся поработать: вырезать, склеить, придать жёсткость. Гораздо удобнее работать с пенопластом. Он лёгкий, как и картон. Продаются пенопластовые панели в строительных магазинах. Если вам хочется сделать цифру потолще, то можно тонкие листы поролона склеить между собой клеем для потолочной плитки.

Но пенопласт — материал капризный: крошится, гранулы липнут к рукам и инструментам. То ещё удовольствие! Как быть?

Идеальный вариант — использовать при работе профессиональный режущий инструмент с нагретой нихромовой нитью. Горячая проволока режет пенопласт, как масло.

Можно сделать резак из паяльника с закреплённой медной проволокой. Эти варианты подходят тем, кто будет делать объемные цифры из салфеток в большом количестве.

Пенопласт ровно режется по металлической линейке: приложите линейку и проведите вдоль по неё резаком. Положите рядом с местом разреза шланг включенного пылесоса. Место работы останется чистым.

Читайте также: Как сделать объемную букву своими руками

Как украсить цифру из салфеток

Теперь, когда вы знаете как сделать заготовку для цифры, попробуем разобраться, чем и как её украсить?

Надо сказать, что для декора используются не только салфетки, но и любая тонкая бумага — папиросная, гофро, тишью. Цвета подбирайте соответственно: нежные — для девочек (сиреневый, розовый, белый, голубой) и яркие — для мальчиков (синий, красный, салатовый).

Украсить цифру из салфеток своими руками можно по-разному:

цветами;
в технике «торцевание»;
бахромой;
сделать цифру-фигурку.

Научимся делать декор для цифры.

Цветы из салфеток

Для фигурки большого размера, украшенной со всех сторон, придётся сделать около 200-400 мелких роз. Самый распространённый декор — цветы. Они подходят и для мальчиков, и для девочек. Цветы должны быть пушистыми, легко собираться. Ведь вам понадобится не один цветочек. Сэкономить время можно, обтянув боковые стороны фигурки гофрированной бумагой или тишью. Тогда вам не придётся сидеть на декором несколько дней.

Перед тем как крепить гофрированные цветы лучше создать тон к ним из гофробумаги

Ну и выбирайте варианты тех цветов, которые получаются самыми пышными: астры или розы.

Для пышной астры из салфеток возьмите:

3 салфетки;
ножницы;
нитки;
сложите салфетки гармошкой;
серединку замотайте нитками, получится бантик;
расправьте лепестки к центру, двигаясь к краям. В середине сделайте бутон, плотно сжав бумагу; нижние листья расправьте, чтобы получилась удобная площадка для приклеивания.

Для розы нужно взять 6 салфеток и степлер.

Складываем салфетки стопкой.
Вырезаем лепестки (несколько полуокружностей).
Разворачиваем розу, сдвигая лепестки.
Скрепляем кончик уголком.
Распушаем цветок.

Попробуйте сделать край цветов волнистым, сделав ножницами зигзаг. Цветок с зубчиками по краям выглядит интересней.

Комбинируйте цвета. Используйте салфетки разных цветов для одного цветочка. Можно провести по краю салфетки линию фломастером.

Читайте также: Цветы из гофрированной бумаги своими руками

Торцевание

Цифры, украшенные в технике торцевания получаются очень пушистыми. Лучше взять гофрированную бумагу, но из однотонных салфеток тоже неплохо получается.

Бумага режется на квадраты.
Затем вы ставите в середину листа карандаш и обжимаете его бумагой.
Прикладываем палочку с бумагой к поверхности, обмазанной клеем.
Заполнив таким образом всю поверхность расправляем декор руками, обрезаем лишнее ножницами.

Метод торцеванияОбъемные цифры методом торцевания выглядят пушистыми и мягкими

Торцеванием можно сделать и цветы.

Для этого приготовьте:

пластилин;
несколько прямоугольных листов бумаги;
палочку для торцевания.

Теперь приступаем к работе:

Разомните пластилин.
Обмотайте палочку бумажкой так, чтобы большая часть оставалась свободной.
Воткните её в кусочек пластилина.
Таким же образом сделайте 3 лепестка.
Заполните пространство между ними лепестками другого цвета.
Серединку, где виден пластилин, закройте кусочком жатой бумаги.

Заготовки из пенопласта — самые подходящие для торцевания. Никакого клея не надо, палочка пронзает мягкий материал, и торцовка остаётся в нём. Можно торцеванием выкладывать узоры внутри фигуры, расчертить декор несколькими диагональными полосками разных цветов.

Бахрома

Это самый простой способ, который на самом деле занимает меньше времени, чем остальные. Но для него нужна длинная полоса. Значит, берём не салфетки, а бумагу тишью.

Складываем бумагу в аккуратный прямоугольник.
Надрезаем.
Расправляем и распушиваем бахрому.
Приклеиваем двухсторонним скотчем к заготовке и обматываем цифру.

Комбинируя цвета, получаем очень яркую и весёлую цифру.

Бахрома выглядит интересней, если наклеена волнами. Цвета бумаги пусть будут контрастными. Так волны будут видны издалека.

Цифры — фигурки

На основе простой цифры сделайте героя из детского мультика, например Микки Мауса.

Саму цифру обклейте в технике торцевания красными и черными салфетками.
Добавьте белые кружочки из бумаги.
Вырежьте из черного картона 2 круга и закрепите их на макушке цифры.

Стилизовать таким образом цифру можно под любого любимого персонажа мультика. Используйте подходящий цвет, добавьте детали из других материалов.

Объемные цифры можно стилизовать под животных: единорога, мишку, зайку, лебедя и других

Теперь, когда вы узнали, чем украсить декоративную композицию, разберем подробно, как сделать цифру из салфеток своими руками.

Мастер-класс цифра из картона

Сделаем небольшую объёмную цифру из упаковочного гофрокартона.

Для этого возьмите:

10 листов картона;
клеевой пистолет;
макетный нож;
6 упаковок салфеток.

Ход работы:

Сделайте шаблон цифры, перенесите его на листы картона.
Макетным ножом вырежьте 10 одинаковых деталей.
Скрепите их между собой горячим клеем.
Из салфеток сделайте розы.
Для этого скрепите несколько салфеток степлером, вырежьте круг, расправьте, формируя цветок.
Приклейте розы к цифре горячим клеем.

Объемная цифра может быть изготовлена из листов гофрокартона, которые приклеиваются друг на друга

Получилась лёгкая и крепкая цифра, которая выдержит самую активную фотосессию. Но есть и другие способы сделать цифры из салфеток: мастер- класс смотрите ниже.

Мастер класс плоская цифра

Когда цифра на день рождения из салфеток нужна лишь для украшения комнаты, и никто не будет брать её в руки и фотографироваться, то можно сделать плоскую цифру из мебельного картона. Тонкий пенопласт тоже придётся кстати.

Возьмите:

картон или пенопласт для основы;
3 пачки салфеток;
двухсторонний скотч;
ножницы;
бечёвку.

Порядок выполнения:

Разметьте на бумаге контур цифры.
Перенесите его на картон.
Вырежьте 2 детали.
Скрепите их между собой скотчем.
Сделайте на обратной стороне петельку для подвешивания.
Обклейте заготовку скотчем.
Сделайте 20-50 цветов (количество зависит от размера цифры).
Снимите защитную плёнку и приклейте цветы.
Расправьте цветочки так, чтобы не была видна основа фигурки.

Дополнительно украсьте промежутки между цветами листьями из зелёной бумаги. Можно сделать бантик из атласной ленты и закрепить его на цифре.

Хотите сделать объёмную цифру? Посмотрите наш следующий мастер-класс Цифра из салфеток на годик своими руками.

Читайте также: Мастерим украшения из бумажных цветов

Цифра для первого дня рождения

Для этой композиции сделаем картонное, полое внутри основание.

Если единичку легко построить на бумаге и вырезать, то как рассчитать длину боковых сторон? Можно всё сделать на глазок, а можно использовать математическую формулу:

P = 2(a + b) ,

где a и b — стороны фигуры.

Сделайте ещё запас для склеивания деталей между собой.

Итак, из чего делается цифра 1 из салфеток:

двойной гофрокартон;
салфетки;
горячий клей;
малярный скотч;
ножницы и макетный нож;
степлер.

Вырежьте из шаблона цифру. Перенесите на картон, вырежьте 2 детали.
Рассчитайте длину сторон фигуры и вырежьте боковые стороны.
Цифра может расширятся книзу. Тогда боковые стороны будут похожи на трапецию.
Скрепите детали вместе, используя малярный скотч. Изнутри закрепите их горячим клеем. Приложите вторую деталь единицы и закрепите малярным скотчем.
Внутреннюю часть стоит заранее укрепить, установите в неё плотно прилегающие кусочки картона. Они выступят рёбрами жесткости, и декор не прогнётся.
По желанию оклейте салфетками.
Из салфеток сложите розы.

Объемные цифры в полный рост ребенка особенно эффектно выглядят на фотосессии

Украсьте цифру 1 на годик большим цветком из салфеток.

Возьмите спицу, накрутите на неё салфетку, снимите трубочку. Чуть расправьте и, скрепив кончики степлером, сделайте лепесток. Серединка цветка — одна гофротрубочка, скатанная по спирали.

Эти цветы похожи на сделанные из воздушных шариков.

Добавьте к комплекту из фигуры помпоны и поздравительную гирлянду.

Читайте также: Красивые украшения из бумажных салфеток

Цифра 2 из салфеток: мастер класс

Для этой цифры на фотосессию мы будем использовать несколько техник. Фон сделаем торцеванием, добавим несколько розочек и сделаем корону.

Основа цифры — пенопласт шириной 10 см.
Можно вырезать 2 части по 5 см и скрепить их горячим клеем.
Для декора — 30 цветов из салфеток, крупные жемчужные бусины.
Желтый или золотой картон для короны.
Дополнительно: двухсторонний скотч, нож, карандаш, ножницы.

Объемная цифра с короной своими руками

Ход работы:

Переносим выкройку двойки на пенопласт. Вырезаем ножом.
Режем салфетки на квадраты. Обматывая кончик карандаша, переносим их на заготовку, закрепляем на пенопласте.
Расправляем ворс, подрезаем. Боковые части обклеиваем гофробумагой или торцуем.
Из салфеток складываем розы, прикрепляем на горячий клей.
Приклеиваем жемчужины.
Из золотой бумаги вырезаем полоску, делаем зубчики, сворачиваем в колечко, закрепляем скотчем.
Приклеиваем корону клеевым пистолетом к цифре.

Вышел отличный подарок для маленькой принцессы. Для транспортировки или хранения фигуру оберните в полиэтилен.

Какого размера делать цифры?

Для детской фотосессии размер декора должен быть с ребёнка или чуть выше. На стол или канди-бар делают компактные номерки.

Примерные размеры единички:

высота 65–70 см, ширина 35 см, глубина — 15 см.
высота 82 см, ширина 45 см, глубина — 12 см
Размер плоской фигурки: 30 х 40 см

Ориентируйтесь на окружающий антураж и рост ребёнка, все расчёты делайте на бумаге в клетку, а затем переносите на заготовку.

Декорированные салфетками цифры понравятся даже взрослому имениннику. Сделайте их в подарок в виде топиария или панно. Не только день рождения, но и праздники 8 Марта и 23 Февраля могут быть украшены декорированными цифрами.

Топиарии с цифрами — отличный подарок на день рождения или на 8 марта

Цифра не должна быть обязательно вся покрыта одинаковыми розочками. Используйте разные цветовые оттенки: на лицевую сторону нежные оттенки, на края — тёмные. Фигура станет выглядеть ещё объёмнее.

Позаботьтесь о том, чтобы цветы держались крепко, но не используйте острые шпажки для фиксации, если знаете, что ребёнок будет играть с цифрой. Композиция для праздника должна быть не только красивой, но и безопасной.

Присоединяйтесь к обсуждению!

Нам было бы интересно узнать вашу точку зрения, оставьте свое мнение в комментариях 😼

200 лучших идей 2019 года

С каждым годом становится все более популярным различный тематический декор. В данном случае речь идет о цифрах. Их можно увидеть не только на детских днях рождения, но и на фотосессиях или даже свадьбах. Смотрятся они очень красиво, особенно на фотографиях. Если вам по душе такие изделия, то предлагаем сделать несколько вариантов своими руками.

Как сделать цифру из салфеток?

Пожалуй, одним из самых простых вариантов являются цифры из салфеток.

Для работы нам понадобятся такие материалы:

картон или коробка;
несколько упаковок салфеток;
ножницы;
голографический лист картона;
степлер;
скотч;
клей момент.

Разрезаем одну салфетку на четыре части одинакового размера.

Две четвертинки соединяем с помощью степлера. То же самое повторяем с остальными.

Обрезаем углы на каждой заготовке, формируя круг.

Аккуратно поднимаем первый слой салфетки и сжимаем его пальцами. Делаем то же самое с каждым слоем.

Немного расправляем лепестки и в результате получается цветок, как показано на фото.

Делаем необходимое количество заготовок по такому же принципу.

Из салфеток белого цвета делаем такие же заготовки. В данном случае они немного больше по размеру, поэтому обрезаем их, чтобы они стали такими же, как красные.

В результате получается довольно много цветов. Но абсолютно все они понадобятся далее.

На листе плотного картона или коробке рисуем цифру. Очень важно, чтобы она была пропорциональной и имела правильную форму.

Вырезаем цифру в двойном экземпляре. Из оставшегося картона вырезаем полоски одинаковой ширины. Они понадобятся для формирования боковых частей.

Приклеиваем полоски к одной цифре с помощью скотча.

Только после этого фиксируем вторую цифру на картонной заготовке.

Приклеиваем цветы на картонный каркас с помощью клея.

Делать это нужно аккуратно, чтобы не помять цветы.

Также можно сделать дополнительный декор цифры в виде короны. Для этого печатаем трафарет на листе бумаги или же рисуем его. Вырезаем заготовку и обводим ее на голографическом картоне.

Вырезаем корону в двойном экземпляре и склеиваем части между собой.

Приклеиваем корону к цветам с помощью клея. Красивый, стильный декор в виде цифры готов!

На самом деле практически всегда для создания цифры используются салфетки. Это не удивительно, ведь именно они позволяют сделать их более пышными.

Объемная цифра: секреты изготовления своими руками

Необходимые материалы:

картон;
деревянные бруски небольшого размера;

скотч;
гофрированная бумага или салфетки;
карандаш;
ножницы;
линейка;
канцелярский нож;
бечевка;
клеевой пистолет.

На листе картона рисуем цифру. Размеры подбирайте индивидуально или же используйте те, что отмечены на фото.

Вырезаем заготовку в двойном экземпляре. Также вырезаем полоски одинаковой ширины для формирования боковых сторон цифры. Приклеиваем полосы к одной из заготовок с помощью скотча. Внутри размещаем деревянные бруски в местах, которые отмечены на фото. При желании прикрепляем отрезок бечевки, чтобы можно было повесить декор на стену.

С помощью горячего пистолета фиксируем второй шаблон цифры.

Вырезаем полоски гофрированной бумаги небольшой ширины.

Приклеиваем каждую полоску на стыки клеевым пистолетом.

Делаем довольно большое количество заготовок квадратной формы из гофрированной бумаги.

Оборачиваем бумажную заготовку вокруг карандаша, наносим на нее клей и фиксируем на картонном каркасе.

Обратите внимание на то, что заготовки нужно приклеивать довольно плотно друг к другу.

Для нижней части цифры и ножки понадобятся заготовки меньшего размера.

Из картона вырезаем основание для ножки цифры и приклеиваем на него несколько брусков для утяжеления.

Соединяем между собой детали и декорируем оставшуюся часть ножки бумажным декором.

На заднюю сторону цифры приклеиваем гофрированную бумагу.

В результате получается потрясающе красивая объемная цифра, которая порадует каждого ребенка.

Цифра из картона своими руками

Любители лаконичного декора однозначно оценят данный вариант цифры из картона.

Подготовим следующее:

плотный картон;
карандаш;
линейка;
краски;
ножницы;
кисть;
листы бумаги;
циркуль;
гофрированная бумага желтого цвета;
клей;
дополнительный декор.

На листе картона рисуем цифру и вырезаем. Окрашиваем в подходящий оттенок и оставляем до полного высыхания. На листе бумаги делаем круги не большого размера с помощью циркуля. Вырезаем их и складываем четыре-пять раз. Обрезаем верхнюю часть, как показано на фото.

Разворачиваем заготовку и повторяем то же самое с остальными.

Из гофрированной бумаги желтого цвета вырезаем полоску. Разрезаем края по нижнему краю, как на фото. Получается своеобразная бахрома. Плотно сворачиваем ее в кружок и фиксируем кончик клеем.

Склеиваем между собой две заготовки белого цвета и посередине прикрепляем желтую часть.

Раскладываем бумажные цветы в хаотичном порядке, после чего приклеиваем их к цифре.

В результате получается милый аксессуар для праздника.

Также из картона можно сделать и другие, не менее оригинальные варианты цифры.

Цифра из гофрированной бумаги

Изделия из гофрированной бумаги всегда смотрятся особенно красиво. Их часто выбирают для тематических фотосессий. Поэтому если вам по душе именно такой вариант, то смело следуйте пошаговому мастер-классу.

В процессе понадобится следующее:

гофрированная бумага;
ножницы;
сантиметр;
резинки;
картон;
клей;
карандаш;
клеевой пистолет.

Из гофрированной бумаги вырезаем полосы одинакового размера.

Немного подворачиваем край с одной стороны заготовки.

В результате заготовка должна выглядеть, как на фото.

Начинаем формировать серединку розочки.

Оборачиваем всю полосу вокруг серединки и закрепляем готовую розочку резинкой или проволокой.

Делаем необходимое количество розочек.

На листе картона рисуем цифру и вырезаем ее. Обклеиваем гофрированной бумагой подходящего цвета. Фиксируем розочки с помощью клеевого пистолета.

Декоративная цифра: самые оригинальные идеи

Сделать объемную цифру своими руками может каждый. Для этого вовсе не нужны слишком дорогие материалы. Ведь при желании можно воспользоваться даже подручными средствами. Проявляйте фантазию, вдохновляйтесь идеями и тогда у вас точно получится красивый декор.

Как сделать цифру своими руками мастер классы

С каждым годом становится все более актуальным различный декор для фотосессии. Это могут быть готовые фотозоны или тематические элементы. Одними из таких являются большие цифры, которые часто используются на детских праздниках или же для фото в честь годовщины для пары. Зачастую стоимость их довольно высока. Поэтому предлагаем несколько простых мастер-классов с помощью которых вы сможете сделать цифры своими руками.

Простая цифра из роз

Тем, кто не занимается рукоделием лучше для начала попробовать сделать что-то простое. К примеру, цифру из роз сможет выполнить любой новичок. Ведь главное – соблюдать инструкцию и не бояться экспериментировать.

Подготовим такие материалы:

картон большого размера;
гофрированная бумага;
клей в пистолете;
ножницы и нож;
степлер;
ручка.

На картоне рисуем цифру необходимого размера и формы. При желании можно сделать большой и маленький вариант для декора. Аккуратно вырезаем цифру канцелярским ножом, чтобы на ней не оставалось заломов.
Приступаем к подготовке розочек. Для этого отрезаем гофрированную бумагу и разрезаем ее на полосы.

Немного растягиваем бумагу, чтобы было удобно формировать цветок. За счет этого длина полосы значительно увеличивается.Загибаем верхний край полосы во внутреннюю сторону.

Поворачиваем полосу обратной стороной, как показано на фото.Загибаем край бумаги, формируя не полный треугольник.Подворачиваем остаток бумаги к началу треугольника, формируя сердцевину. Чтобы цветок был более ровным, лучше для его создания использовать ручку, как показано на фото. Постепенно накручиваем гофрированную бумагу, фиксируя по нижнему краю. Чем больше будет слоев бумаги, тем более открытой будет розочка.

Когда цветок будет необходимой формы, вынимаем ручку и закрепляем основание степлером. Формируем остальные цветочки. При желании можно сделать их разноцветными, тогда цифра будет очень яркой и необычной. Раскладываем розочки на заготовке, при необходимости делаем еще несколько штук.

Когда все готово, берем цветок и отрезаем его у основания. На заготовку наносим немного горячего клея и приклеиваем розу. Оставшийся хвостик не выбрасываем, а оставляем для работы. Заполняем всю заготовку розочками.

Когда основная часть работы сделана, приступаем к оставшимся хвостикам. Поочередно расправляем их и приклеиваем на пустые места. При желании можно их распушить немного больше, чтобы цифра смотрелась еще более объемной.

Прекрасная цифра для праздника готова!

Цифра в зимнем стиле

Для работы подготовим:

картон;
гофрированная бумага в нескольких оттенках;
канцелярский нож;
карандаш;
ножницы;
скотч;
простая бумага для печати;
клей в пистолете;
лента из страз;
акварельные краски и кисть;
декоративные снежинки.

Рисуем на картоне цифру необходимого размера и вырезаем ее канцелярским ножом. Делаем две одинаковых заготовки.Вырезаем полосы из картона необходимой ширины, чтобы сделать цифру объемной. Аккуратно приклеиваем их скотчем к одной из сторон.

Прикладываем сверху вторую заготовку в виде цифры и приклеиваем ее скотчем.

Отрезаем полосы гофрированной бумаги разных оттенков.

Разрезаем их на маленькие кусочки, как показано на фото. Белую бумагу для печати нарезаем на полосы и обклеиваем цифру. Приклеиваем кусочки белой гофрированной бумаги по краям.
Плотно заполняем средину двумя цветами. Чтобы придать зимний стиль цифре, наносим немного белого и голубого оттенка акварельной краски. Приклеиваем декоративные снежинки поверх гофрированной бумаги.

При желании можно сбоку приклеить ленту из страз. Цифра из салфеток

Если тратиться на специальную бумагу вы не хотите, то отличной альтернативой для создания цифры к празднику могут быть салфетки.

Кроме них нам понадобится:

картон;
ножницы;
степлер;
клей;
карандаш.

На картоне рисуем цифру и аккуратно вырезаем ее.

Берем простую салфетку и формируем из нее гармошку, как показано на фото.

Складываем заготовку пополам и закрепляем степлером.

Край салфетки обрезаем, придавая ему волнистую форму.

Раскрываем заготовку и придаем ей более пышный вид.

Наносим клей на картонную заготовку и прикрепляем первый цветок.

Повторяем то же самое с остальными цветочками.

Стильный элемент для праздника и фотосессии готов!

Объемная цифра

Сделать красивую, большую цифру для торжественного мероприятия – задача не из легких. Ведь такая работа очень трудоемкая и затратная по времени. Но если вы полны решимости, то приступаем к процессу создания.

Подготовим такие материалы:

картон или пенопласт большого размера;
гофрированная бумага в нескольких оттенках;
маленькие воздушные шарики;
ножницы;
нитки;
клей в пистолете;
проволока;
линейка.

Вначале подготовим основу. Из картона или пенопласта вырезаем цифру необходимого размера.

При желании ее можно окрасить специальной аэрозольной краской.

Тем временем приступаем к созданию цветочков. Для этого берем один лист бумаги и складываем ее гармошкой.

Разрезаем на две части таким образом, чтобы один был больше другого.

Берем отрезок меньшего размера, расправляем и складываем его пополам.

Разрезаем его на две части.

Берем часть, которую отложили вначале. Складываем ее гармошкой и разрезаем ее пополам. Подготавливаем все отрезки для создания цветов разного размера.

Все последующие шаги повторяем поочередно для каждого отрезка, которые мы подготовили ранее.

Ставим проволоку посредине отрезка гофрированной бумаги и закручиваем ее.

Закругляем края бумаги ножницами.

Аккуратно расправляем и растягиваем края, формируя пышный цветок.

Повторяем то же самое с остальными отрезками, формируя красивые цветы разного размера.

Прикрепляем цветочки к заготовке из пенопласта или картона при помощи клея.

Надуваем небольшие шарики и декорируем ими цифру для праздника.

Объемная цифра: интересные идеи

Если вы решились повторить один из мастер-классов, то обязательно попробуйте дополнить цифру своими деталями. К примеру, необычным декором или сочетанием цветов. Мы специально подготовили несколько идей для вдохновения.

8 объёмных образов на весну — Wonderzine

Текст: Аня Кротикова

МЫ НЕУСТАННО СЛЕДИМ за новыми тенденциями, но многие из них вызывают массу вопросов: насколько это пригодно к жизни? Как и с чем носить кроп-топы, волосатые кеды, плюшевые куртки и прозрачное всё? Где искать самую универсальную верхнюю одежду на весну — бомбер, — мы уже рассказывали. Теперь разбираемся, с чем сочетать эту модную куртку.

Бомбер, топ с высоким горлом, виниловая юбка и мюли

Ставшее уже классическим сочетание обуви на невысоком каблуке и виниловой юбки этой весной дизайнеры предлагают комбинировать с объёмным бомбером. Правильную подсказку ищите у марки Cienne: верхнюю одежду и низ в одной цветовой гамме стилисты марки разбавили светлым топом с высоким воротом и белоснежной обувью. Хороший вариант для рабочих будней (если офисный дресс-код позволяет) и вечерних прогулок.

Бомбер, шейный платок, шёлковая рубашка и босоножки

О не самом тривиальном комбо «бомбер плюс шейный платок» в этом сезоне тоже вспомнили многие. Дизайнеры Balenciaga пошли дальше всех и выпустили уже готовый вариант с широким шарфом. Марка Babyghost подсказывает, как повторить образ на миллион: к шёлковой рубашке подойдут лаконичные аксессуары вроде босоножек с тонкими ремешками и простая сумка-авоська.

Бомбер, светлая рубашка, клёши

и остроносая обувь

Поднадоевший за последние пару лет ретрообраз в духе
70-х со светлой рубашкой и синими клёшами Isabel Marant предлагают освежить с помощью нарочито спортивного оверсайз-бомбера (здесь работает правило «чем больше, тем лучше») и остроносой обуви, как никогда популярной этой весной. Не забывайте и о других приметах 2018 года: сумке-торбе из цветной замши и крупных ожерельях.

Бомбер, юбка плиссе, ретроочки

и яркая обувь

Подзабытые за последние годы юбки плиссе вновь возвращаются на подиумы (и полки магазинов соответственно). Современное прочтение образа с хитом 2010 года предлагают Iceberg: в паре с бомбером, яркими ботильонами-носками и крупными очками в квадратной оправе. Правильный вариант для прохладных осенних вечеров и долгих посиделок с друзьями.

Бомбер, юбка миди, блуза и лаковая обувь

Почти что офисный образ Off-White: бомбер и юбка миди в тон, блуза в китайском стиле и сапоги с узким голенищем. Для тёплых дней в качестве обуви больше подойдут босоножки с цветными ремешками, но остальные вещи лука советуем взять на заметку. Современная версия двойки и яркая рубашка отлично впишутся в нестрогий пятничный дресс-код.

Бомбер, худи, трикотажные брюки, обувь на каблуке

Курс на комфорт, версия 2.0: широкие трикотажные брюки и худи дизайнеры Unravel смело комбинируют с бондажным ремнём, огромным бомбером и обувью на каблуке. Если образ кажется рискованным, попробуйте заменить туфли на удобные кроссовки, а взамен треников выбирайте брюки со стрелками или любимую пару джинсов.

Бомбер, худи,

платье в пайетках
и ажурные колготки

Ажурные колготки, о которых все говорили этой осенью, всё ещё появляются в весенних коллекциях (и есть подозрение, что через полгода этот аксессуар своей популярности не утратит). Если вы уже успели обзавестись любимой парой с причудливым узором, берите на вооружение образ из осенней коллекции Faith Connection. В паре с объёмным бомбером, платьем в пайетках и олимпийкой в классической расцветке.

Бомбер, футбольные бутсы, шёлковый топ, треники, авоська

По мнению дизайнеров Melitta Baumeister, футбольные бутсы — достойная пара на выход (или замена привычным «уродливым» ботинкам). Насколько комфортно перемещаться по городу в шипованной обуви, мы пока не выяснили, но в остальном поддерживаем задумку на сто процентов: что может быть удобнее сводного бомбера, комбинезона на широких бретелях и лёгкой рубашки?

Фотографии: Cienne, Babyghost, Isabel Marant, Iceberg, Off-White, Unravel, Faith Connexion, Melitta Baumeister, Zoe Jordan

SveltoStella | Костюмы sv-stl4198-04 — Женщинам, Костюмы, Костюм двойка

stella shop

stellashop

sveltostella

svelto stella

toptan

wholesale

оптовая

بالجملة

toptan giyim

wholesale clothing

одежда оптом

ملابس بالجملة

Toptan satış yeni sezon kadın giyim

wholesale new season women clothing

оптом новый сезон женская одежда

الجملة ملابس النساء الموسم الجديد

Toptan satış kadın giyim

wholesale women clothing

оптом женская одежда

ملابس نسائية بالجملة

Toptan satış kadın elbise

wholesale women dress

оптом женское платье

الجمله لباس المرأة

Wholesale büyük beden

Wholesale large size

Оптом большой размер

الجملة الكبيرة الحجم

toptan battal elbiseler

Wholesale battal dresses

Платья баталь

فساتين باتل بالجمله

online alışveriş

online shopping

Онлайн шоппинг

التسوق عبر الانترنت

Toptan satış dükkan

wholesale shop

оптовый магазин

متجر الجملة

Tedarikçi

supplier

поставщик

المورد

toptancı tedarikçisi

wholesale supplier

оптовый поставщик

المورد بالجملة

giyinmek

wear

износ

البس، ارتداء

Toptan satış fiyatları

wholesale deals

оптовые предложения

عروض بالجملة

toptancı

wholesaler

оптовик

تاجر جملة

toplu giyim

bulk clothing

основная одежда

الملابس السائبة

toptan bayan giyim türkiye

bulk women clothing in turkey

основная женская одежда в турции

ملابس النساء بالجملة في تركيا

bayan giyim türkiye

women clothing in turkey

женская одежда в турции

ملابس نسائية في تركيا

toptan bayan giyim türkiye

wholesale women clothing in turkey

оптом женская одежда в турции

ملابس نسائية بالجملة في تركيا

türkiyede toptancı

wholesale supplier in turkey

оптовый поставщик в турции

المورد بالجملة في تركيا

Toptan satış laleli

wholesale supplier in laleli

оптовый поставщик в Лалели

المورد بالجملة في لاليلي

İstanbulda toptancı

wholesale supplier in istanbul

оптовый поставщик в Стамбуле

المورد بالجملة في اسطنبول

Toptan Tedarikçiler Online

Wholesale Suppliers Online‎

Оптовые поставщики онлайн

الموردون بالجملة على الإنترنت

Clothing — Wholesale Suppliers Online

Rekabetçi fiyat ile toptan giyim sunan

Offering clothing wholesale with competitive price

Предложение одежды оптом с конкурентоспособной ценой

تقديم الملابس بالجملة بأسعار تنافسية

Wholesale Clothing — B2B Wholesale

Kadın Giyim Toptan Satış

Womens Clothing Wholesale‎

Женская одежда оптом

ملابس نسائية بالجملة

Türk Tekstil Sanayii Toptancısı

Turkish Textile Manufacturing Wholesaler

Турецкий оптовый производитель текстиля

تاجر جملة لصناعة المنسوجات التركية

Toptan Moda

Wholesale Fashion

Оптовая Мода

أزياء بالجملة

Toptan Moda Giyim Pazarı

Wholesale Fashion Clothing Marketplace

Оптовый рынок модной одежды

الجمله سوق الازياء والملابس

Toptan satış butik

wholesale boutique

оптовый бутик

الجملة بوتيك

Toptan satış butik giyim

wholesale boutique clothing

оптом бутик одежды

بوتيك الملابس بالجمله

Butikler için Toptan Trendy Perakende Moda Giyim

Wholesale Trendy Retail Fashion Clothing for Boutiques

Оптовые продажи модной розничной одежды для бутиков

ملابس عصرية للبيع بالتجزئة بالجملة للملابس

butik giyim

boutique apparel

бутик одежды

ملابس بوتيك

bayan giyim üreticisi toptan

womens clothing wholesale from the manufacturer

женская одежда оптом от производителя

ملابس نسائية بالجملة من الشركة المصنعة

bayan giyim toptan satışı türkiye

womens clothing wholesale from Turkey

женская одежда оптом из турции

ملابس نسائية بالجملة من تركيا

aracısız imalatçıdan Türkiyeden bayan giyim

womens clothing from Turkey in bulk from the manufacturer without intermediaries

женская одежда из турции оптом от производителя без посредников

ملابس نسائية من تركيا بكميات كبيرة من الشركة المصنعة بدون وسطاء

aracısız imalatçıdan Türkiyeden bayan giyim

womens clothing from Turkey wholesale from the manufacturer without intermediaries

одежда из турции оптом от производителя без посредников женская

ملابس نسائية من تركيا بالجملة من الشركة المصنعة بدون وسطاء

женская одежда из турции оптом

womens clothing from Turkey wholesale

женская одежда из турции оптом

ملابس نسائية من تركيا بالجملة

bayan giyim toptan Novosibirsk

womens clothing wholesale Novosibirsk

женская одежда оптом новосибирск

ملابس نسائية بالجملة نوفوسيبيرسك

bayan moda giyim türkiye

fashionable womens clothing wholesale from the manufacturer turkey

модная женская одежда оптом от производителя турция

ملابس نسائية عصرية بالجملة من الشركة المصنعة تركيا

bayan giyim bishkek üreticiden toptan satış

womens clothing bishkek wholesale from the manufacturer

женская одежда бишкек оптом от производителя

ملابس نسائية bishkek بالجملة من الشركة المصنعة

bayan triko toptan satışı

womens knitwear wholesale

женский трикотаж оптом

تريكو المرأة بالجمله

yüksek kaliteli bayan giyim toptan

high-quality womens clothing wholesale

качественная женская одежда оптом

ملابس نسائية عالية الجودة بالجملة

ucuz bayan giyim tedarikçileri türkiye

cheap womens clothing suppliers from turkey

поставщики женской одежды оптом из турции дешево

الملابس النسائية الرخيصة الموردين من تركيا

kadın bluzu

womens blouse

женская блузка

بلوزة نسائية

kadın mantoları

womens coats

женские пальто

معاطف نسائية

kadın elbisesi

women Dress

платье женщин

لباس المرأة

kadın ceketler

women Jackets

женские куртки

جاكيتات نسائية

kadın kot pantolon

women JeansWear

женская джинсовая одежда

المرأة الجينز

kadın triko

women Knitwear

женский трикотаж

تريكو المرأة

kadın tulumları

womens Overalls

комбинезоны женские

وزرة نسائية

kadın pantolon

womens Pants

штаны женские

السراويل النسائية

kadın etek

womens Skirt

юбка женская

التنورة النسائية

Kadın Tunik

womens Tunic

женская туника

سترة نسائية

kadın yelek

womens Vest

женский жилет

سترة نسائية

Kadın Tişörtü

womens T-Shirt

женская футболка

تي شيرت نسائي

Kadın iç giyimi

Womens underwear

Женское нижнее белье

الملابس الداخلية النسائية

Kadın Spor Giyim

Womens Sportswear

Женская спортивная одежда

ملابس رياضية نسائية

Kadın Büyük Beden

Womens Plus Size

Женский плюс размер

المرأة زائد الحجم

Kadın Büyük Beden

Womens big Size

Большой женский размер

الحجم الكبير للمرأة

Kadın Süper Büyük Beden

Womens Super big Size

Женский супер большой размер

الحجم الكبير للمرأة

Kadın çift takım

Womens double suit

Женский двойной костюм

بدلة نسائية مزدوجة

Kadın gömlek

Women Shirt

Женская рубашка

قميص المرأة

kısa kollu gündüz elbiseler

short sleeve daytime dresses

дневные платья с коротким рукавом

فساتين قصيرة الأكمام النهار

Günlük Elbiseler

Casual Dresses

Повседневные платья

فساتين كاجوال

kadınlar için günlük elbiseler

casual dresses for women

повседневные платья для женщин

فساتين كاجوال للنساء

50 yaş üstü kadınlar için günlük elbiseler

casual dresses for women over 50

повседневные платья для женщин старше 50 лет

فساتين كاجوال للنساء فوق سن الخمسين

günlük elbiseler büyük beden

casual dresses big size

повседневные платья большого размера

فساتين عادية الحجم الكبير

yaz elbiseler büyük beden

summer dresses big size

летние платья большого размера

فساتين الصيف الحجم الكبير

online elbiseler

dresses online

платья онлайн

فساتين على الانترنت

istanbulda elbiseler

dresses in istanbul

платья в Стамбуле

فساتين في اسطنبول

büyük bedenler -toptan kadın elbise

large sizes women dress

больших размеров -опт

فستان نسائي مقاسات كبيرة

büyük beden bayan giyim

plus size women’s clothing

женская одежда больших размеров

ملابس نسائية كبيرة الحجم

toptan giyim Moskova

wholesale clothing Moscow

одежда оптом Москва

ملابس بالجملة موسكو

battal beden kadın palto-toptan

plus size women’s coats -wholesale

женские пальто больших размеров -оптовый

معاطف نسائية بمقاسات كبيرة — بالجملة

toptan giyim resmi siteleri-mağaza -ukraine

wholesale clothing official sites -shop -ukraine

одежда оптом официальные сайты -магазин -украина

المواقع الرسمية للملابس بالجملة — متجر — أوكرانيا

giyim mağazası toptan + ve perakende

clothing store wholesale + and retail

магазин одежды оптом +и розница

متجر لبيع الملابس بالجملة + والتجزئة

toptan + ve perakende giyim internet

wholesale + and retail clothing internet

оптом +и розницу одежда интернет

تجارة الجملة + والتجزئة للملابس على الانترنت

toptan elbise

dress wholesale

платье оптом

فستان بالجملة

toptan kıyafet al

buy clothes wholesale

купить одежду оптом

شراء الملابس بالجملة

bayan giyim toptan -büyük beden bayan-internet-mağaza -modaya uygun -moskova -novosibirsk -resmi-battal beden bayan-bahçıvan -istanbul -fileo

women’s clothing wholesale -big size women-internet -shop -fashionable -moscow -novosibirsk -official -plussize women -gardener -site -istanbul -fileo

женская одежда оптом -больший -интернет -магазин -модный -москва -новосибирск -официальный -размер -садовод -сайт -стамбул -филео

ملابس نسائية بالجملة — حجم كبير للنساء — انترنت — متجر — عصري — موسكو — نوفوسيبيرسك — رسمي — نسائي زائد الحجم — جاردنر — موقع — اسطنبول — فيليو

Beyaz Rusya giyim toptan + ve perakende

Belarusian clothing wholesale + and retail

белорусская одежда оптом +и розницу

ملابس بيلاروسية بالجملة + والتجزئة

online giyim mağazası toptan

online clothing store wholesale

интернет-магазин одежды оптом

متجر لبيع الملابس عبر الإنترنت بالجملة

Toptan 24 çevrimiçi giyim mağazası

wholesale 24 online clothing store

оптом 24 интернет магазин одежды

البيع بالجملة 24 متجر لبيع الملابس عبر الإنترنت

monroe giyim toptan

monroe clothing wholesale

монро одежда оптом

ملابس مونرو بالجملة

Toptan bayan giyim novosibirsk

wholesale womens clothing novosibirsk

женская одежда оптов новосибирск

ملابس نسائية بالجملة نوفوسيبيرسك

giyim + türkiye toptan

clothes + from turkey wholesale

одежда +из турции оптом

ملابس + من تركيا بالجملة

toptan giyim tedarikçileri

wholesale clothing suppliers

поставщики одежды оптом

موردي الملابس بالجملة

bahçıvan giyim toptancısı -kadın-moskova -site

gardener clothing wholesale -women -moscow -site

садовод одежда оптом -женский -москва -сайт

ملابس بستاني بالجملة -نساء -موسكو -موقع

Moskova için toptan giyim — çocuklar için — kadınlar için

wholesale clothing for Moscow — for children — for women

одежда оптов москве -детская -женский

ملابس بالجملة لموسكو — للأطفال — للنساء

toptan giyim fiyatları — Türkiye

wholesale clothing prices — Turkey

одежда оптом цены -турция

أسعار الملابس بالجملة — تركيا

mutlu giyim toptancı

happy clothing wholesale

хеппивеар одежда оптом

ملابس سعيدة بالجملة

Toptan giyim rusça

wholesale clothing russian

одежда оптом россия

البيع بالجملة للملابس الروسية

ucuz giyim toptancısı

cheap clothing wholesale

дешевая одежда оптом

ملابس رخيصة بالجملة

toptan giyim + düşük fiyatlar

wholesale clothing + low prices

одежда оптом +по низким ценам

ملابس بالجملة + أسعار منخفضة

çevrimiçi giyim mağazası toptan + ve + perakende

online clothing store wholesale + and + retail

интернет магазин одежды оптом +и +в розницу

متجر لبيع الملابس عبر الإنترنت بالجملة + و + التجزئة

stella giyim türkiye resmi web sitesi

stella clothing turkey official website

стелла одежда турция официальный сайт

الموقع الرسمي لملابس ستيلا تركيا

Salvezza , Santa Clara , Jazz Line , Sementa Tekstil Laleli , Andorra

büyük beden kadın giyim stella markası

big size women clothing stella brand

женская одежда большого размера stella brand

ملابس نسائية كبيرة الحجم ماركة ستيلا

B&G Store, Bagiza Toptan Tesettür Giyim, Romano Botta , Sharbet

stella online toptan satış websitesi

stella online wholesale website

стелла онлайн оптовый сайт

موقع ستيلا للبيع بالجملة على الإنترنت stella

Sharbet Abiye , Max Cavalera , Solido ,Esratash Халат , Kameya

EFOR Laleli Toptan Satış ve Outlet Mağazası , Vatoz Fashion , Babilon Fashion Store

stella mağazası toptan kadın giyim

stella store wholesale women’s clothing

стелла магазин женской одежды оптом stella

متجر stella ملابس نسائية بالجملة

https://www.babilonstore.com https://www.fimkastore.com

istabnul bayan giyim stella store

istabnul women’s clothing stella store

istabnul магазин женской одежды stella

متجر استبنول ستيلا للملابس النسائية

fimkastore , babilonstore , dossodossifashionshow , dossodossi, dosso dossi

velvet waggon vivento white house greentous Center gross robin vokzal

stella kadın giyim mağazası

stella women’s clothing store

магазин женской одежды stella

stella متجر لبيع الملابس النسائية

toptanbayangiyim , Dimare , Nocturne , Turkopt , Guitar Wholesale Shop

rizetta ronin bebe plus lefon dilvin sabra samsara sensi solida

shendel societa star gate star time şanlı tekstil tango tatu vangeliza vannes

stanbul toptan giyim , Turkish Textile Manufacturing Wholesaler ,parisianwholesale , wholesalefashionsquare

gel al giyas gizia icon intersan jadore vatoz joymıss

kaner keikei kima kingsland koton la chere lasagrada lasiea lendy

maryland lapaza norm okcu paradıso my twins party 21 pert line

lashowroom ,tashaapparel , yehwang ,elleraapparel ,fashionpo, dresshead

abbara adilışık al gore amıro aysel aron babılon bethoven balızza

butella butik dayı darkmen dosso dossi dzyn line fellicita fenka fervente

wholesale7 ,fashionkorb ,lushclothing ,bloomwholesale

behcetti, kapris, depishop, chilia, sultana, ladiyya, sirius, marisis, clupfashion, clup fashion

stella mağazası istanbul

stella shop istanbul

магазин стелла стамбул

متجر ستيلا في اسطنبول

ЭКО-ДВОЙКА ИЗ ИТАЛЬЯНСКОЙ ПРЯЖИ 1193 красный

Выберите категорию размеров

Обхват груди (Ог)
Измеряется по наиболее выступающим точкам груди (для плечевых изделий *).
Обхват талии (От)
Измеряется в самой узкой части талии.
Обхват бёдер (Об)
Измеряется по наиболее выступающим точкам бедер, при этом поставьте ноги вместе (для поясных изделий **).

Например:

Ваши размеры 89-72-97 (Ог-От-Об)

Значит ваш размер:

плечевых изделий — 44
для поясных изделий — 46

Евро размер	XXS	XS	S	M	L	XL	XXL	3XL	4XL	5XL	6XL	7XL	8XL	9XL	10XL	11XL	12XL
Российский размер	38	40	42	44	46	48	50	52	54	56	58	60	62	64	66	68	70
Обхват груди, см	76	80	84	88	92	96	100	104	108	112	116	120	124	128	132	136	140
Обхват талии, см	55	59	63	68	72	76	80	85	89	94	98	103	108	114	119	125	131
Обхват бедер, см	84	88	92	96	100	104	108	112	116	120	124	128	132	136	140	144	148

Евро размер	24	25	26	27	28	29	30	31	32	33	34	36	38	40	42	44	46
Российский размер	40	40-42	42	42-44	44	44-46	46	46-48	48	48-50	50	52	54	56	58	60	62
Обхват талии, см	59	60-62	63	64-67	68	69-71	72	73-75	76	77-79	80	85	89	94	98	103	108
Обхват бедер, см	88	89-91	92	93-95	96	97-99	100	101-103	104	105-107	108	112	116	120	124	128	132

Размер	65	70	75	80	85	90	95	100	105	110	115	120
Обхват под грудью, см	63-67	68-72	73-77	78-82	83-87	88-92	93-97	98-102	103-107	108-112	113-117	118-122
Размер чашечки	A	B	C	D	F	E	G

Евро размер	34	34-36	36	36-38	38	38-40	40	40-42	42	42-44	44	44-46	46	46-48	48	48-50	50
Российский размер	40	40-42	42	42-44	44	44-46	46	46-48	48	48-50	50	52	54	56	58	60	62
Обхват талии, см	59	60-62	63	64-67	68	69-71	72	73-75	76	77-79	80	85	89	94	98	103	108
Обхват бедер, см	88	89-91	92	93-95	96	97-99	100	101-103	104	105-107	108	112	116	120	124	128	132

Чтобы узнать свой размер, достаточно измерить обхват ладони любой руки без большого пальца, не перетягивая её сантиметром.

Размеры в дюймах	6	6,5	7	7,5	8	8,5
Объем ладони, см	16	18	19	20	22	23

Евро размер	XXS	XS	S	M	L	XL	XXL	3XL
Обхват головы, см	54	55	56	57	58	59	60	61

Например:

Ваши размеры 100-91-107 (Ог-От-Об)

Значит ваш размер:

плечевых изделий — 50
для поясных изделий — 52

Евро размер	XXS	XS	S	M	L	XL	XXL	3XL	4XL	5XL	6XL	7XL	8XL	9XL	10XL
Российский размер	42	44	46	48	50	52	54	56	58	60	62	64	66	68	70
Обхват груди, см	84	88	92	96	100	104	108	112	116	120	124	128	132	136	140
Обхват талии, см	72	76	80	84	88	92	96	100	104	108	112	116	120	124	128
Обхват бедер, см	92	93	98	101	104	106	110	113	116	119	122	125	128	131	134

Евро размер	28	29	30	31	32	33	34	36	38	40	42	44
Российский размер	44	44-46	46	46-48	48	48-50	50	52	54	56	58	60
Обхват талии, см	76	77-79	80	81-83	84	85-87	88	92	96	100	104	108
Обхват бедер, см	93	94-97	98	99-100	101	102-103	104	106	110	113	116	119

Размеры в дюймах	7,5	8	8,5	9	9,5	10
Объем ладони, см	20	22	23	24	26	27

Евро размер	XXS	XS	S	M	L	XL	XXL	3XL
Обхват головы, см	54	55	56	57	58	59	60	61

Например:

Ваши размеры 66-60-71 (Ог-От-Об)

Значит ваш размер:

плечевых изделий — 9 лет
для поясных изделий — 9 лет

Размер	18	18	20	20	22	24	26	28	28-30	30-32	32	34	34-36	36	38	40-42	42-44
Возраст	0-1 мес.	1-2 мес.	3-6 мес.	7-9 мес.	1 год	1,5 года	2 года	3 года	4 года	5 лет	6 лет	6-7 лет	8 лет	9-10 лет	12 лет	14 лет	15 лет
Рост, см	50-56	56-68	68-74	74-80	80-86	86-92	92-98	98-104	104-110	110-116	116-122	122-128	128-134	134-140	140-152	152-158	158-164
Обхват груди, см	41-43	43-45	45-49	49-51	51-52	52-54	53-55	54-56	55-57	56-58	57-59	58-62	61-65	64-68	67-75	75-80	80-84
Обхват талии, см	41-43	43-45	45-48	48-50	51	52	53	53,5	54	54,5	55	55-56,5	56-58	58-59,5	59-65	65-67	67-69
Обхват бедер, см	41-43	43-45	45-47	47-51	51-53	52-54	53-56	55-58	57-60	59-62	61-64	63-67	66-70	69-74	74-82	82-86	86-90

Возраст	0-1 год	1-2 года	2-3 года	4-5 лет	6-7 лет	8-9 лет	10-11 лет	12-13 лет
Рост, см	68-74	80-86	92-98	104-110	116-122	128-134	140-146	150-152
Длина стопы, см	12	14	15	16	18	20	22	23
Обхват бедер, см	48	48-52	58	58-62	64-66	68-72	76-80	84

Возраст	0-6 мес.	6-12 мес.	1-2 года	2-3 года	4-6 года	7-8 лет	9-10 лет	11-12 лет
Размеры в дюймах	0	0	1	2	3	4	5	6
Объем ладони, см	10	11	12	13	14	15	16	17

Возраст	0-3 мес.	3-6 мес.	6-12 мес.	1-2 года	2-3 года	3-5 года	5-8 лет
Обхват головы, см	35-40	40-44	44-46	46-48	48-50	50-54	52-56

* Плечевые изделия: платья, туники, жакеты, футболки, топы, корсеты, пуловеры, пиджаки, куртки, пальто, плащи
** Поясные изделия: юбки, брюки, шорты, леггинсы, лосины, джинсы, капри, трусы, комбинезоны

Высокоскоростная объемная двухфотонная флуоресцентная визуализация нервно-сосудистой динамики

Devor, A. et al. Подавление нейрональной активности и одновременное сужение артериол могут объяснить отрицательный сигнал, зависимый от уровня оксигенации крови. J. Neurosci. 27 , 4452–4459 (2007).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

Петцольд, Г. К., Альбеану, Д.Ф., Сато Т. Ф. и Мурти В. Н. Связь нервной активности с кровотоком в обонятельных клубочках опосредуется астроцитарными путями. Neuron 58 , 897––910 (2008).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

Дрю, П. Дж., Ши, А. Ю. и Кляйнфельд, Д. Колебания и сенсорно-индуцированная вазодинамика в коре головного мозга грызунов увеличивают емкость артериол. Proc. Natl Acad.Sci. США 108 , 8473–8478 (2011).

ADS CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

Огава, С., Ли, Т. М., Кей, А. Р. и Танк, Д. В. Магнитно-резонансная томография головного мозга с контрастированием, зависящим от оксигенации крови. Proc. Natl Acad. Sci. США 87 , 9868–9872 (1990).

ADS CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

Gagnon, L. et al. Количественная оценка микрососудистого происхождения BOLD-fMRI из первых принципов с помощью двухфотонной микроскопии и чувствительного к кислороду нанозонда. J. Neurosci. 35 , 3663–3675 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

Логотетис, Н. К., Паулс, Дж., Аугат, М., Тринат, Т. и Эльтерманн, А. Нейрофизиологическое исследование основы сигнала фМРТ. Природа 412 , 150–157 (2001).

ADS CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

Ванцетта И. и Гринвальд А. Увеличение коркового окислительного метаболизма из-за сенсорной стимуляции: значение для функциональной визуализации мозга. Наука 286 , 1555–1558 (1999).

CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

Shih, A. Y. et al. Активное расширение проникающих артериол восстанавливает приток эритроцитов к полутени неокортекса после фокального инсульта. J. Cereb. Кровоток. Метаб. 29 , 738–751 (2009).

PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

Shih, A. Y. et al. Самый маленький инсульт: закупорка одного проникающего сосуда приводит к инфаркту и когнитивному дефициту. Nat. Neurosci. 16 , 55 (2012).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar

10.

Чжан С., Бойд Дж., Делани К. и Мерфи Т. Х. Быстрые обратимые изменения в структуре дендритного шипа in vivo, зависящие от степени ишемии. J. Neurosci. 25 , 5333 (2005).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

11.

Хуанг, Ж.-Й. и другие. Двухфотонная флуоресцентная микроскопия in vivo выявляет нарушение мозгового капиллярного кровотока и повышенную восприимчивость к ишемическим инсультам у мышей с диабетом. CNS Neurosci. Ther. 20 , 816–822 (2014).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

12.

Lee, S. et al. Исследование двухфотонной визуализации in vivo в реальном времени показывает уменьшение объема сосудов головного мозга и повышение проницаемости гематоэнцефалического барьера у мышей, находящихся в хроническом стрессе. Sci. Отчет 8 , 13064 (2018).

ADS PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar

13.

Winkler, E.A. et al. Снижение уровня GLUT1 усугубляет васкулонейрональную дисфункцию и дегенерацию при болезни Альцгеймера. Nat. Neurosci. 18 , 521–530 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

14.

Суини, М. Д., Сагаре, А. П. и Злокович, Б. В. Нарушение гематоэнцефалического барьера при болезни Альцгеймера и других нейродегенеративных расстройствах. Nat. Rev. Neurol. 14 , 133–150 (2018).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

15.

Cruz Hernández, J. C. et al. Адгезия нейтрофилов в капиллярах головного мозга снижает корковый кровоток и ухудшает функцию памяти в моделях на мышах с болезнью Альцгеймера. Nat. Neurosci. 22 , 413–420 (2019).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar

16.

Гринвальд, А., Лике, Э., Фростиг, Р. Д., Гилберт, К. Д. и Визель, Т. Н. Функциональная архитектура коры головного мозга, выявленная с помощью оптического изображения внутренних сигналов. Nature 324 , 361–364 (1986).

ADS CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

17.

Berwick, J. et al. Гемодинамический ответ у крыс без анестезии: внутренняя оптическая визуализация и спектроскопия коры ствола. J. Cereb. Кровоток. Метаб. 22 , 670–679 (2002).

PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

18.

Сиротин, Ю. Б. и Дас, А. Предвосхищающие гемодинамические сигналы в сенсорной коре головного мозга не предсказываются локальной нейронной активностью. Природа 457 , 475–479 (2009).

ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

19.

Shih, A. Y. et al. Двухфотонная микроскопия как инструмент для изучения кровотока и нервно-сосудистых связей в мозге грызунов. J. Cereb. Кровоток. Метаб. 32 , 1277–1309 (2012).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

20.

Денк У., Стриклер Дж. И Уэбб У. Двухфотонная лазерная сканирующая флуоресцентная микроскопия. Science 248 , 73–76 (1990).

ADS CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

21.

Кляйнфельд, Д., Митра, П. П., Хельмхен, Ф. и Денк, В. Флуктуации и вызванные стимулом изменения кровотока, наблюдаемые в отдельных капиллярах в слоях 2–4 неокортекса крысы. Proc.Natl Acad. Sci. США 95 , 15741–15746 (1998).

ADS CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

22.

Kleinfeld, D. et al. Руководство для определения логики нейрососудистой передачи сигналов в головном мозге. Фронт. Нейроэнергетика 3 , 1 (2011).

PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

23.

Tang, P. et al. Двухфотонная визуализация in vivo отмирания аксонов, кровотока и притока кальция с терапией метилпреднизолоном после травмы спинного мозга. Sci. Отчет 5 , 9691 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

24.

Келли П., Худри Э., Хоу С. и Бакскаи Б. Дж. Двухфотонная визуализация структуры и функции астроцитов при болезни Альцгеймера in vivo. Фронт. Aging Neurosci. 10 , 219- (2018).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar

25.

Шен, З., Лу, З., Чхатбар, П. Й., О’Херрон, П. и Кара, П. Специфический для артерий флуоресцентный краситель для изучения сосудисто-нервного взаимодействия. Nat. Методы 9 , 273–276 (2012).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

26.

O’Herron, P. et al. Нейронные корреляты гемодинамических ответов одного сосуда in vivo. Природа 534 , 378–382 (2016).

ADS PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar

27.

Blinder, P. et al. Кортикальный ангиом: взаимосвязанная сосудистая сеть с неколоночными структурами кровотока. Nat. Neurosci. 16 , 889–897 (2013).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

28.

Э. Ботчерби, Р. Юшкайтис и Т. Уилсон. Сканирующая двухфотонная флуоресцентная микроскопия с увеличенной глубиной резкости. Опт. Commun. 268 , 253–260 (2006).

ADS CAS Статья Google Scholar

29.

Theriault, G. et al. Расширенная двухфотонная микроскопия живых образцов с пучками Бесселя: более стабильный фокус, более быстрое сканирование объема и более простое стереоскопическое изображение. Фронт. Cell Neurosci. 8 , 139 (2014).

PubMed PubMed Central Google Scholar

30.

Терио Г., Де Конинк Ю. и Маккарти Н. Микроскопия с увеличенной глубиной резкости для быстрой объемной двухфотонной визуализации. Опт. Экспресс 21 , 10095–10104 (2013).

ADS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

31.

Лу, Р.и другие. Объемное функциональное изображение мозга с частотой видеоизображения при синаптическом разрешении. Nat. Neurosci. 20 , 620 (2017).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

32.

Лу, Р., Танимото, М., Кояма, М. и Джи, Н. Объемное функциональное изображение с частотой 50 Гц и плавно регулируемой глубиной резкости. Биомед. Опт. Экспресс 9 , 1964–1976 (2018).

PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

33.

Meng, G. et al. Высокопроизводительная двухфотонная флуоресцентная микроэндоскопия с разрешением синапсов для объемной визуализации глубоких слоев мозга in vivo. eLife 8 , e40805 (2019).

PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

34.

Велфорд У. Т. Использование кольцевых апертур для увеличения глубины фокуса. J. Opt. Soc. Являюсь. 50 , 749–753 (1960).

ADS Статья Google Scholar

35.

Mayhew, J. E. et al. Церебральная вазомоция: колебание 0,1 Гц при отображении нервной активности в отраженном свете. NeuroImage 4 , 183–193 (1996).

CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

36.

Stefanovic, B. et al. Функциональная реактивность церебральных капилляров. J. Cereb. Кровоток. Метаб. 28 , 961–972 (2008).

PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

37.

Hall, C. N. et al. Капиллярные перициты регулируют церебральный кровоток при здоровье и болезни. Природа 508 , 55–60 (2014).

ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

38.

Tian, P. et al. Зависящая от глубины кортикальная микрососудистая дилатация лежит в основе ламинарных различий функционального сигнала МРТ, зависимого от уровня оксигенации крови. Proc. Natl Acad. Sci. США 107 , 15246–15251 (2010).

ADS CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

39.

Cai, C. et al. Вызванное стимуляцией увеличение мозгового кровотока и локальное сужение сосудов капилляров зависят от проводимых сосудистых реакций. Proc. Natl Acad. Sci. США 115 , E5796 – E5804 (2018).

CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

40.

Чен Б. Р., Бушар М. Б., МакКаслин А. Ф., Берджесс С. А. и Хиллман Э. М. Высокоскоростная сосудистая динамика гемодинамического ответа. NeuroImage 54 , 1021–1030 (2011).

PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

41.

Гао, Ю. Р. и Дрю, П. Дж. Влияние произвольной локомоции и пептида, связанного с геном кальцитонина, на динамику одиночных сосудов твердой мозговой оболочки у бодрствующих мышей. J. Neurosci. 36 , 2503–2516 (2016).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

42.

Reimer, J. et al. Колебания зрачка отслеживают быстрое переключение корковых состояний во время спокойного бодрствования. Нейрон 84 , 355–362 (2014).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

43.

Chhatbar, P. Y. & Kara, P. Улучшенные измерения скорости кровотока с помощью гибридной фильтрации изображений и алгоритма итеративного преобразования Радона. Фронт. Neurosci. 7 , 106 (2013).

PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

44.

Honkura, N. et al. Инструменты анализа на основе прижизненной визуализации для идентификации сосудов и оценки сопутствующих динамических сосудистых событий. Nat. Commun. 9 , 2746 (2018).

ADS PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar

45.

Song, A. et al. Объемное двухфотонное изображение нейронов с использованием стереоскопии (vTwINS). Nat. Методы 14 , 420–426 (2017).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

46.

Ян, Ю.и другие. Двухфотонная лазерная сканирующая стереомикроскопия для быстрой объемной визуализации. PLoS ONE 11 , e0168885 (2016).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar

47.

Подгорски К. и Ранганатан Г. Нагрев мозга, вызванный лазерами ближнего инфракрасного диапазона во время многофотонной микроскопии. J. Neurophysiol. 116 , 1012–1023 (2016).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

48.

Стирман, Дж. Н., Смит, И. Т., Куденов, М. В. и Смит, С. Л. Широкое поле зрения, многозональная двухфотонная визуализация нейрональной активности в головном мозге млекопитающих. Nat. Biotechnol. 34 , 857–862 (2016).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

49.

Zhang, T. et al. Двухфотонное изображение мозга в килогерцах у бодрствующих мышей. Nat. Методы 16 , 1119–1122 (2019).

CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

50.

Ван К., Хортон Н. Г., Чаран К. и Сюй К. Усовершенствованные волоконно-солитонные источники для нелинейной визуализации глубоких тканей в биофотонике. IEEE J. Sel. Вершина. Квантовая электроника. 20 , 50–60 (2014).

ADS Статья CAS Google Scholar

51.

Cheng, H.и другие. 2-фотонная флуоресцентная микроскопия глубокого мозга in vivo с возбуждением в окне 1700 нм. Опт. Lett. 44 , 4432–4435 (2019).

ADS CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

52.

Родригес, К., Лян, Ю., Лу, Р. и Джи, Н. Трехфотонная флуоресцентная микроскопия с аксиально вытянутым фокусом Бесселя. Опт. Lett. 43 , 1914–1917 (2018).

ADS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

53.

Родригес К. и Джи Н. Адаптивная оптическая микроскопия для нейробиологии. Curr. Opin. Neurobiol. 50 , 83–91 (2018).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar

54.

Джи Н. Адаптивная оптическая флуоресцентная микроскопия. Nat. Методы 14 , 374–380 (2017).

CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

55.

Attwell, D. et al. Глиальный и нейрональный контроль мозгового кровотока. Природа 468 , 232–243 (2010).

ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

56.

Чиполла, М. Дж. Церебральное кровообращение. Серия коллоквиумов по физиологии интегрированных систем: от молекулы к функции 27–32 (Morgan & Claypool Life Sciences, 2009).

57.

Кулик Т., Кусано, Ю., Аронхим, С., Сандлер, А. Л. и Винн, Х. Р. Регуляция сосудистой сети головного мозга в нормальном и ишемическом мозге. Нейрофармакология 55 , 281–288 (2008).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

58.

Ито, Ю. и Сузуки, Н. Контроль капиллярного кровотока головного мозга. J. Cereb. Кровоток. Метаб. 32 , 1167–1176 (2012).

PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

59.

Пеппиат, К. М., Ховарт, К., Моббс, П. и Аттвелл, Д. Двунаправленный контроль диаметра капилляров ЦНС перицитами. Природа 443 , 700–704 (2006).

ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

60.

Пизауро, М. А., Бенуччи, А. и Карандини, М. Локальный и глобальный вклад в гемодинамическую активность в коре головного мозга мышей. J. Neurophysiol. 115 , 2931–2936 (2016).

PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

61.

Кардосо, М. М. Б., Сиротин, Ю. Б., Лима, Б., Глушенкова, Э. и Дас, А. Сигнал нейровизуализации — это линейная сумма нервно-различающихся компонентов, связанных со стимулом и задачей. Nat. Neurosci. 15 , 1298–1306 (2012).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

62.

Мерфи П. Р., О’Коннелл Р. Г., О’Салливан М., Робертсон И. Х. и Балстерс Дж. Х. Коварии диаметра зрачка с BOLD-активностью в голубом пятне человека. Hum. Brain Mapp. 35 , 4140–4154 (2014).

PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

63.

Liu, Y., Rodenkirch, C., Moskowitz, N., Schriver, B. & Wang, Q. Динамическая латерализация расширения зрачка, вызванная активацией голубого пятна, является результатом симпатического, а не парасимпатического воздействия. Cell Rep. 20 , 3099–3112 (2017).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

64.

Шрайвер, Б. Дж., Багдасаров, С. и Ван, К. Возбуждение, связанное с зрачком, модулирует поведение крыс, выполняющих задачу распознавания направления отклонения усов. J. Neurophysiol. 120 , 1655–1670 (2018).

PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

65.

Ларсен, Р. С. и Уотерс, Дж. Нейромодуляторные корреляты расширения зрачка. Фронт. Нейронные схемы 12 , 21 (2018).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar

66.

Гамель Э. Периваскулярные нервы и регуляция цереброваскулярного тонуса. J. Appl. Physiol. 100 , 1059–1064 (2006).

PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

67.

Valmianski, I. et al. Автоматическая идентификация флуоресцентно меченных клеток мозга для быстрой функциональной визуализации. J. Neurophysiol. 104 , 1803–1811 (2010).

PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

68.

Гебель, В., Кампа, Б. М. и Хельмхен, Ф. Визуализация динамики сотовой сети в трех измерениях с помощью быстрого трехмерного лазерного сканирования. Nat. Методы 4 , 73–79 (2007).

PubMed Статья CAS PubMed Central Google Scholar

69.

Wu, J. -L. и другие. Сверхбыстрое лазерное сканирование с растянутым во времени изображением в видимых длинах волн. Light Sci. Прил. 6 , e16196 (2017).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

70.

Wu, J. et al. Килогерцовая двухфотонная флуоресцентная микроскопия, визуализация нервной активности in vivo. Nat. Методы 17 , 287–290 (2020).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

71.

Лин М. З. и Шнитцер М. Дж. Генетически закодированные индикаторы нейрональной активности. Nat. Neurosci. 19 , 1142–1153 (2016).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar

72.

Sun, W., Tan, Z., Mensh, B.D. & Ji, N. Thalamus обеспечивает слой 4 первичной зрительной коры с входными сигналами, настраиваемыми на ориентацию и направление. Nat. Neurosci. 19 , 308 (2015).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar

Реагенты Карла Фишера

Aquastar

^® Реагенты для волюметрического титрования Карла Фишера

Объемный метод титрования Карла Фишера используется для определения содержания воды путем добавления йодсодержащего титранта к образцу, который затем растворяется или диспергируется в подходящем растворителе.Этот метод рекомендуется для более высокого содержания воды (от 100 ppm до 100%) и обеспечивает быстрые, точные и воспроизводимые результаты с высокой скоростью титрования. Мы различаем одно- и двухкомпонентное титрование.

Однокомпонентные реагенты — В методе однокомпонентного титрования все реакционноспособные соединения, такие как йод, основание, диоксид серы и соответствующий спирт, необходимые для реакции Карла Фишера, присутствуют в одном реагенте — титранте. Комбинированные титранты Aquastar ^® доступны в различных концентрациях для определения повышенного и пониженного содержания воды.Aquastar ^® CombiMethanol и Aquastar ^® CombiSolvent без метанола — это растворители, обычно используемые с однокомпонентными титрантами. Однокомпонентное титрование предпочтительно для титрования различных матриц образцов и для образцов, требующих добавления солюбилизатора.
Двухкомпонентные реагенты — В двухкомпонентной системе титрант состоит из йода и метанола, тогда как диоксид серы и основание растворены в растворителе. Двухкомпонентные титранты Aquastar ^® должны использоваться вместе с двухкомпонентным растворителем Aquastar ^®.Двухкомпонентный волюметрический метод Карла Фишера показывает улучшенную буферную емкость, более высокую скорость титрования и немного лучшую стабильность титра. Они часто используются для серий из одних и тех же матриц проб или для кислых или щелочных проб.
Реагенты для альдегида и кетонов — Aquastar ^® CombiTitrant 5 Кето и CombiSolvent Кето-реагенты учитываются при выполнении титрования по Карлу Фишеру для определения воды в образцах кетонов и альдегидов. Эти реагенты не содержат метанола, чтобы предотвратить побочные реакции и получение ненадежных результатов.
Специальные реагенты для масел и жиров — выберите наши реагенты Aquastar ^® CombiSolvent Oil, CombiSolvent Fat или Solvent Oils & Fats для определения точного содержания воды в маслах, жирах и длинноцепочечных углеводородах. Образцы, содержащие масла и жиры (например, минеральные масла, растительные масла, жиры, кремы или мази), должны быть полностью растворены или диспергированы для определения содержания воды. В зависимости от типа масла или жира для растворения или полного извлечения воды из пробы для определения воды требуются разные растворители.

Aquastar

^® Кулонометрические реагенты

Кулонометрическое титрование по Карлу Фишеру предпочтительно для жидких проб с очень низким содержанием воды (10–10 000 частей на миллион). Наша линейка кулонометрических реактивов Карла Фишера Aquastar доступна для титровальных ячеек с диафрагмой и без нее. Наши кулонометрические реагенты CombiCoulomat frit, CombiCoulomat fritless и Anolyte для кулонометрического титрования по Карлу Фишеру без диафрагмы не содержат хлороформа для получения точных результатов.Для вашего удобства наши комбинированные реагенты CombiCoulomat frit и CombiCoulomat без фритты содержат все компоненты реакции в одном растворе и могут использоваться как для анодных, так и для катодных ячеек. Мы также предлагаем специальные реагенты, не содержащие метанол, для проб альдегидов и кетонов. Наши реагенты Анолит К и Католит К разработаны для точного определения содержания воды в образцах альдегидов и кетонов.

Aquastar

^® Водные стандарты

Ассортимент Aquastar ^® содержит широкий спектр превосходных стандартов воды для определения титра, мониторинга оборудования Карла Фишера и проверки результатов измерений.Наши стандарты на воду являются сертифицированными эталонными материалами в соответствии с ISO 17034 и измеряются с использованием утвержденных процедур в нашей лаборатории, аккредитованной согласно DIN EN ISO / IEC 17025. Для обеспечения прозрачности мы предоставляем сертификат анализа для каждой партии документации по управлению качеством (QM).

SmartChemicals для титрования и титрования по Карлу Фишеру

Наша инновационная технология титрования Supelco ^® обеспечивает связь между SmartChemicals и титратором. Наши смарт-титранты Aquastar ^® Karl Fischer и SmartStandard Aquastar ^® передают данные на титратор по беспроводной сети.Краткое прикосновение к метке SmartChemical RFID (радиочастотная идентификация) устраняет ошибки передачи, экономит время, защищает данные и повышает эффективность.

34801-1L — HYDRANAL Titrant 5 Реагент для объемного двухкомпонентного титрования по Карлу Фишеру, стеклянная бутыль, 1 л

Запросите ценовое предложение

Введите свои данные, чтобы получить бесплатное ценовое предложение.

Замечания

Добавьте примечание с любыми особыми запросами, инструкциями по доставке или другой важной информацией

У вас есть общее замечание по этому запросу?

Платежные реквизиты

Введите данные вашего платежного адреса.

Сведения для доставки

Введите пункт назначения, чтобы получить расценки на доставку. Если не указано иное, указана стандартная доставка.

Адрес доставки такой же, как и адрес для выставления счетов

* Поля, обязательные для заполнения

Обратите внимание, что отправка запроса автоматически создаст для вас учетную запись клиента.

Как это работает?

Добавьте продукты по вашему выбору в корзину
Введите свои контактные данные и отправьте запрос
Наши ценовые предложения будут отправлены вам по электронной почте.
Вы просто оформляете заказ и ждете своего заказа

Зачем вам мои контактные данные?

Нам нужен ваш адрес электронной почты, чтобы отправить вам наше предложение, и мы должны знать, что вы настоящий человек.

Микроскопия с увеличенной глубиной резкости для быстрой объемной двухфотонной визуализации

В новом тысячелетии мозг и нейробиология заняли центральное место в международных совместных усилиях. Мозг состоит из миллиардов нейронов, связанных между собой триллионами синапсов.Расшифровать его структуру и функции — один из самых смелых проектов, когда-либо реализованных научным сообществом. Разработка более совершенных технологий обработки изображений снова предоставляет мощные инструменты для решения этой грандиозной задачи. Для выявления сложной структурной организации и функциональной динамики мозга широко используются различные методы визуализации, включая рентгеновскую компьютерную томографию, магнитно-резонансную томографию, позитронно-эмиссионную компьютерную томографию, ультразвуковую визуализацию, электронную микроскопию и флуоресцентную микроскопию.Среди них только флуоресцентная микроскопия обеспечивает высокую контрастность, высокую специфичность и высокое пространственно-временное разрешение изображений in vivo. Благодаря недавнему прогрессу в фотонике, лазерной физике, информатике и науке о наноматериалах вековая область оптических изображений сейчас возрождается и переживает бум. Последние разработки в области трехфотонной микроскопии позволяют оптическое разрешение активности отдельных нейронов на глубине до 2 мм под поверхностью коры и неинвазивную визуализацию активности отдельных нейронов через неповрежденный непрозрачный череп.Появление фотонно-эффективной микроскопии со структурированным освещением со сверхвысоким разрешением позволяет получать изображения живых клеток с пространственным разрешением <90 нм и скоростью сбора данных 564 кадра в секунду, а также позволяет получать изображения со сверхвысоким разрешением в течение более часа с минимальное фото-отбеливание. С другой стороны, световая микроскопия способна визуализировать ~ 100000 нейронов всего мозга рыбок данио с объемной частотой визуализации> 10 Гц. Другие инновации, такие как формирование изображений в ближнем инфракрасном диапазоне, фотоакустическая томография и адаптивная оптика, также расширяют пространственное и временное разрешение, глубину изображения и возможности трансмасштабной объемной визуализации.Другой сдвиг парадигмы — регистрация мозговой активности свободно движущихся и ведущих себя животных, что связано с технологическими инновациями в области миниатюрной микроскопии с высоким пространственно-временным разрешением. В связи с этим мы недавно разработали быстрый миниатюрный двухфотонный микроскоп с высоким разрешением (FHIRM-TPM) с головной частью весом всего 2,2 г и размером менее 1 см ³, оснащенный линзой GRIN с NA 0,8. Поскольку флуоресцентные индикаторы Ca² GFP и GCaMP6 обычно используются в биомедицине, мы разработали и изготовили на заказ фотонно-кристаллическое волокно с полой сердцевиной для излучения фемтосекундных лазерных импульсов с длиной волны 920 нм с небольшой дисперсией и затуханием.FHIRM-TPM способен в течение длительного времени регистрировать нейронную активность у мышей со свободным поведением с одностержневым и субмиллисекундным пространственно-временным разрешением (0,64 мкм в поперечном направлении и 3,35 мкм в осевом направлении, 40 Гц при 256 × 256 пикселей для растрового сканирования и 10000 Гц. для произвольного сканирования). Будущие применения этой технологии во многих поведенческих парадигмах помогут решить многие фундаментальные вопросы, такие как пространственная и временная обработка информации, обучение и память, принятие решений и социальные взаимодействия.Таким образом, уделяя особое внимание разработке более совершенных технологий визуализации, ученые могут непосредственно визуализировать нейронную активность глубже в мозгу, значительно быстрее с супер-разрешением и во многих порядках пространственно-временных масштабов. С техническими достижениями, разворачивающимися по нескольким направлениям (например, зонды, детекторы, слияние модальностей и визуализация с использованием глубокого обучения), систематические прорывы предоставят исследователям мозга и нейробиологам возможность получить целостное представление о многоуровневой активности мозга на уровнях кластеров нейронов, ядер и схем связи на большие расстояния.Наконец, мы предполагаем, что методы визуализации с высоким разрешением, позволяющие в целом регистрировать активность мозга с разрешением одного нейрона у мелких млекопитающих, могут стать реальностью в течение следующего десятилетия.

Титрант Карла Фишера K5, для объемного двухкомпонентного титрования кетонов и альдегидов

Положения и условия

Спасибо, что посетили наш сайт. Эти условия использования применимы к веб-сайтам США, Канады и Пуэрто-Рико (далее «Веб-сайт»), которыми управляет VWR («Компания»).Если вы заходите на веб-сайт из-за пределов США, Канады или Пуэрто-Рико, пожалуйста, посетите соответствующий международный веб-сайт, доступный по адресу www.vwr.com, для ознакомления с применимыми условиями. Все пользователи веб-сайта подчиняются следующим условиям использования веб-сайта (эти «Условия использования»). Пожалуйста, внимательно прочтите эти Условия использования перед доступом или использованием любой части веб-сайта. Заходя на веб-сайт или используя его, вы соглашаетесь с тем, что прочитали, поняли и соглашаетесь соблюдать настоящие Условия использования с поправками, которые время от времени вносятся, а также Политику конфиденциальности компании, которая настоящим включена в настоящие Условия использования. Если вы не желаете соглашаться с настоящими Условиями использования, не открывайте и не используйте какие-либо части веб-сайта.

Компания может пересматривать и обновлять настоящие Условия использования в любое время без предварительного уведомления, разместив измененные условия на веб-сайте. Продолжение использования вами веб-сайта означает, что вы принимаете и соглашаетесь с пересмотренными Условиями использования. Если вы не согласны с Условиями использования (в которые время от времени вносятся поправки) или недовольны Веб-сайтом, вашим единственным и исключительным средством правовой защиты является прекращение использования Веб-сайта.

Использование сайта

Информация, содержащаяся на этом веб-сайте, предназначена только для информационных целей. Хотя считается, что информация верна на момент публикации, вам следует самостоятельно определить ее пригодность для вашего использования. Не все продукты или услуги, описанные на этом веб-сайте, доступны во всех юрисдикциях или для всех потенциальных клиентов, и ничто в настоящем документе не предназначено как предложение или ходатайство в какой-либо юрисдикции или какому-либо потенциальному покупателю, где такое предложение или продажа не соответствует требованиям.

Покупка товаров и услуг

Настоящие Условия и положения распространяются только на использование веб-сайта. Обратите внимание, что условия, касающиеся обслуживания, продаж продуктов, рекламных акций и других связанных мероприятий, можно найти по адресу https://us.vwr.com/store/content/externalContentPage.jsp?path=/en_US/about_vwr_terms_and_conditions.jsp , и эти условия регулируют любые покупки продуктов или услуг у Компании.

Интерактивные функции

Веб-сайт может содержать службы досок объявлений, области чата, группы новостей, форумы, сообщества, личные веб-страницы, календари и / или другие средства сообщения или связи, предназначенные для того, чтобы вы могли общаться с общественностью в целом или с группой ( вместе «Функция сообщества»).Вы соглашаетесь использовать функцию сообщества только для публикации, отправки и получения сообщений и материалов, которые являются надлежащими и относятся к конкретной функции сообщества. Вы соглашаетесь использовать веб-сайт только в законных целях.

A. В частности, вы соглашаетесь не делать ничего из следующего при использовании функции сообщества:
1. Оскорблять, оскорблять, преследовать, преследовать, угрожать или иным образом нарушать законные права (например, право на неприкосновенность частной жизни и гласность) других.
2. Публиковать, размещать, загружать, распространять или распространять любую неприемлемую, непристойную, дискредитирующую, нарушающую авторские права, непристойную, непристойную или незаконную тему, название, материал или информацию.
3. Загружайте файлы, которые содержат программное обеспечение или другие материалы, защищенные законами об интеллектуальной собственности (или правами на неприкосновенность частной жизни), если вы не владеете или не контролируете права на них или не получили все необходимое согласие.
4. Загрузите файлы, содержащие вирусы, поврежденные файлы или любое другое подобное программное обеспечение или программы, которые могут повредить работу чужого компьютера.
5. Перехватить или попытаться перехватить электронную почту, не предназначенную для вас.
6. Рекламировать или предлагать продавать или покупать какие-либо товары или услуги для любых деловых целей, если такая функция сообщества специально не разрешает такие сообщения.
7. Проводите или рассылайте опросы, конкурсы, финансовые пирамиды или письма счастья.
8. Загрузите любой файл, опубликованный другим пользователем функции сообщества, который, как вы знаете или разумно должен знать, не может распространяться на законных основаниях таким образом или что у вас есть договорное обязательство сохранять конфиденциальность (несмотря на его доступность на веб-сайте).
9. Подделывать или удалять любые ссылки на авторов, юридические или другие надлежащие уведомления, обозначения собственности или ярлыки происхождения или источника программного обеспечения или других материалов, содержащихся в загружаемом файле.
10. Предоставление ложной информации о принадлежности к какому-либо лицу или организации.
11. Участвовать в любых других действиях, которые ограничивают или препятствуют использованию веб-сайта кем-либо или которые, по мнению Компании, могут нанести вред Компании или пользователям веб-сайта или подвергнуть их ответственности.
12. Нарушать любые применимые законы или постановления или нарушать любой кодекс поведения или другие правила, которые могут быть применимы к какой-либо конкретной функции Сообщества.
13. Собирать или иным образом собирать информацию о других, включая адреса электронной почты, без их согласия.

B. Вы понимаете и признаете, что несете ответственность за любой контент, который вы отправляете, вы, а не Компания, несете полную ответственность за такой контент, включая его законность, надежность и уместность. Если вы публикуете сообщения от имени или от имени вашего работодателя или другого юридического лица, вы заявляете и гарантируете, что у вас есть на это право. Загружая или иным образом передавая материалы в любую область веб-сайта, вы гарантируете, что эти материалы являются вашими собственными или находятся в общественном достоянии или иным образом свободны от проприетарных или иных ограничений, и что вы имеете право размещать их на веб-сайте.Кроме того, загружая или иным образом передавая материалы в любую область веб-сайта, вы предоставляете Компании безотзывное, бесплатное право во всем мире на публикацию, воспроизведение, использование, адаптацию, редактирование и / или изменение таких материалов любым способом, в любые и все средства массовой информации, известные в настоящее время или обнаруженные в будущем по всему миру, в том числе в Интернете и World Wide Web, для рекламных, коммерческих, торговых и рекламных целей, без дополнительных ограничений или компенсации, если это не запрещено законом, и без уведомления, проверки или одобрения.

C. Компания оставляет за собой право, но не принимает на себя никакой ответственности (1) удалить любые материалы, размещенные на веб-сайте, которые Компания по своему собственному усмотрению сочтет несовместимыми с вышеуказанными обязательствами или иным образом неприемлемыми по любой причине. ; и (2) прекратить доступ любого пользователя ко всему или к части веб-сайта. Однако Компания не может ни просмотреть все материалы до того, как они будут размещены на веб-сайте, ни обеспечить быстрое удаление нежелательных материалов после их размещения.Соответственно, Компания не несет ответственности за какие-либо действия или бездействие в отношении передач, сообщений или контента, предоставленных третьими сторонами. Компания оставляет за собой право предпринимать любые действия, которые она сочтет необходимыми для защиты личной безопасности пользователей этого веб-сайта и общественности; тем не менее, Компания не несет ответственности перед кем-либо за выполнение или невыполнение действий, описанных в этом параграфе.

D. Несоблюдение вами положений пунктов (A) или (B) выше может привести к прекращению вашего доступа к веб-сайту и может повлечь за собой гражданскую и / или уголовную ответственность.

Особое примечание о содержании функций сообщества

Любой контент и / или мнения, загруженные, выраженные или отправленные с помощью любой функции сообщества или любого другого общедоступного раздела веб-сайта (включая области, защищенные паролем), а также все статьи и ответы на вопросы, кроме контента, явно разрешенного Компания, являются исключительно мнениями и ответственностью лица, представляющего их, и не обязательно отражают мнение Компании.Например, любое рекомендованное или предлагаемое использование продуктов или услуг, доступных от Компании, которое публикуется через функцию сообщества, не является признаком одобрения или рекомендации со стороны Компании. Если вы решите следовать какой-либо такой рекомендации, вы делаете это на свой страх и риск.

Ссылки на сторонние сайты

Веб-сайт может содержать ссылки на другие веб-сайты в Интернете. Компания не несет ответственности за контент, продукты, услуги или методы любых сторонних веб-сайтов, включая, помимо прочего, сайты, связанные с Веб-сайтом или с него, сайты, созданные на Веб-сайте, или стороннюю рекламу, и не делает заявлений относительно их качество, содержание или точность.Наличие ссылок с веб-сайта на любой сторонний веб-сайт не означает, что мы одобряем, поддерживаем или рекомендуем этот веб-сайт. Мы отказываемся от всех гарантий, явных или подразумеваемых, в отношении точности, законности, надежности или действительности любого контента на любых сторонних веб-сайтах. Вы используете сторонние веб-сайты на свой страх и риск и в соответствии с условиями использования таких веб-сайтов.

Права собственности на контент

Вы признаете и соглашаетесь с тем, что все содержимое веб-сайта (включая всю информацию, данные, программное обеспечение, графику, текст, изображения, логотипы и / или другие материалы) и его дизайн, выбор, сбор, расположение и сборка являются являются собственностью Компании и защищены законами США и международными законами об интеллектуальной собственности.Вы имеете право использовать содержимое веб-сайта только в личных или законных деловых целях. Вы не можете копировать, изменять, создавать производные работы, публично демонстрировать или исполнять, переиздавать, хранить, передавать, распространять, удалять, удалять, дополнять, добавлять, участвовать в передаче, лицензировать или продавать какие-либо материалы в Интернете. Сайт без предварительного письменного согласия Компании, за исключением: (а) временного хранения копий таких материалов в ОЗУ, (б) хранения файлов, которые автоматически кэшируются вашим веб-браузером для улучшения отображения, и (в) печати разумного количество страниц веб-сайта; в каждом случае при условии, что вы не изменяете и не удаляете какие-либо уведомления об авторских правах или других правах собственности, включенные в такие материалы.Ни название, ни какие-либо права интеллектуальной собственности на любую информацию или материалы на веб-сайте не передаются вам, а остаются за Компанией или соответствующим владельцем такого контента.

Товарные знаки

Название и логотип компании, а также все связанные названия, логотипы, названия продуктов и услуг, появляющиеся на веб-сайте, являются товарными знаками компании и / или соответствующих сторонних поставщиков. Их нельзя использовать или повторно отображать без предварительного письменного согласия Компании.

Отказ от ответственности

Компания не несет никакой ответственности за материалы, информацию и мнения, предоставленные или доступные через Веб-сайт («Контент сайта»). Вы полагаетесь на Контент сайта исключительно на свой страх и риск. Компания не несет никакой ответственности за травмы или ущерб, возникшие в результате использования любого Контента Сайта.
ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖАНИЕ САЙТА И ПРОДУКТЫ И УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ ИЛИ ДОСТУПНЫЕ ЧЕРЕЗ САЙТ, ПРЕДОСТАВЛЯЮТСЯ НА УСЛОВИЯХ «КАК ЕСТЬ» И «ПО ДОСТУПНОСТИ», СО ВСЕМИ ОШИБКАМИ.КОМПАНИЯ И НИ ЛИБО, СВЯЗАННОЕ С КОМПАНИЕЙ, НЕ ДАЕТ НИКАКИХ ГАРАНТИЙ ИЛИ ЗАЯВЛЕНИЙ В ОТНОШЕНИИ КАЧЕСТВА, ТОЧНОСТИ ИЛИ ДОСТУПНОСТИ ВЕБ-САЙТА. В частности, НО БЕЗ ОГРАНИЧЕНИЯ ВЫШЕИЗЛОЖЕННОГО, НИ КОМПАНИЯ И НИ ЛИБО, СВЯЗАННОЕ С КОМПАНИЕЙ, НЕ ГАРАНТИРУЕТ ИЛИ ЗАЯВЛЯЕТ, ЧТО ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖАНИЕ САЙТА ИЛИ УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ НА САЙТЕ ИЛИ С ПОМОЩЬЮ САЙТА, БУДУТ ТОЧНЫМИ, НАДЕЖНЫМИ ИЛИ БЕСПЛАТНЫМИ ИЛИ БЕСПЛАТНЫМИ ЧТО ДЕФЕКТЫ БУДУТ ИСПРАВЛЕНЫ; ЧТО ВЕБ-САЙТ ИЛИ СЕРВЕР, КОТОРЫЙ ДЕЛАЕТ ЕГО ДОСТУПНЫМ, НЕ СОДЕРЖИТ ВИРУСОВ ИЛИ ДРУГИХ ВРЕДНЫХ КОМПОНЕНТОВ; ИЛИ ЧТО ВЕБ-САЙТ ИНАЧЕ ОТВЕЧАЕТ ВАШИМ ПОТРЕБНОСТЯМ ИЛИ ОЖИДАНИЯМ.КОМПАНИЯ ОТКАЗЫВАЕТСЯ ОТ ВСЕХ ГАРАНТИЙ, ЯВНЫХ ИЛИ ПОДРАЗУМЕВАЕМЫХ, ВКЛЮЧАЯ ЛЮБЫЕ ГАРАНТИИ КОММЕРЧЕСКОЙ ЦЕННОСТИ, ПРИГОДНОСТИ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕННОЙ ЦЕЛИ И НЕ НАРУШЕНИЯ.
НИ ПРИ КАКИХ ОБСТОЯТЕЛЬСТВАХ КОМПАНИЯ ИЛИ ЕЕ ЛИЦЕНЗИАРЫ ИЛИ ПОДРЯДЧИКИ НЕ НЕСЕТ ОТВЕТСТВЕННОСТИ ЗА ЛЮБЫЕ УБЫТКИ ЛЮБОГО РОДА, ПО ЛЮБОЙ ЮРИДИЧЕСКОЙ ТЕОРИИ, ВОЗНИКАЮЩИЕ ИЛИ В СВЯЗИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ВАМИ ИЛИ НЕВОЗМОЖНОСТЬЮ ИСПОЛЬЗОВАТЬ ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖИМОЕ САЙТА, ЛЮБЫЕ УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ НА ВЕБ-САЙТЕ ИЛИ ЧЕРЕЗ ВЕБ-САЙТ ИЛИ ЛЮБОЙ САЙТ, ВКЛЮЧАЮЩИЙ ПРЯМЫЕ, КОСВЕННЫЕ, СЛУЧАЙНЫЕ, СПЕЦИАЛЬНЫЕ, КОСВЕННЫЕ ИЛИ КАРАТНЫЕ УБЫТКИ, ВКЛЮЧАЯ, НО НЕ ОГРАНИЧИВАЯСЯ, ЛИЧНЫЕ ТРАВМЫ, ПОТЕРЯ ПРИБЫЛИ ИЛИ УБЫТКОВ , ВИРУСЫ, УДАЛЕНИЕ ФАЙЛОВ ИЛИ ЭЛЕКТРОННЫХ СООБЩЕНИЙ, ИЛИ ОШИБКИ, УПУЩЕНИЯ ИЛИ ДРУГИЕ НЕТОЧНОСТИ НА ВЕБ-САЙТЕ ИЛИ СОДЕРЖАНИИ САЙТА ИЛИ УСЛУГ, ИЛИ ИЛИ НЕ ИСПОЛЬЗУЕТСЯ КОМПАНИЯ, И ПРЕДОСТАВЛЯЛА ЛИ КОМПАНИЯ ВОЗМОЖНОСТЬ ЛЮБЫЕ ТАКИЕ УБЫТКИ, ЕСЛИ НЕ ЗАПРЕЩЕНЫ ПРИМЕНИМЫМ ЗАКОНОДАТЕЛЬСТВОМ.

Компенсация

Вы соглашаетесь возместить и обезопасить Компанию и ее должностных лиц, директоров, агентов, сотрудников и других лиц, участвующих в работе Веб-сайта, от любых обязательств, расходов, убытков и издержек, включая разумные гонорары адвокатам, возникающих в результате любое нарушение вами настоящих Условий использования, использование вами Веб-сайта или любых продуктов, услуг или информации, полученных с Веб-сайта или через него, ваше подключение к Веб-сайту, любой контент, который вы отправляете на Веб-сайт через любые Функция сообщества или нарушение вами каких-либо прав другого лица.

Применимое право; Международное использование

Настоящие условия регулируются и толкуются в соответствии с законами штата Пенсильвания без учета каких-либо принципов коллизионного права. Вы соглашаетесь с тем, что любые судебные иски, вытекающие из настоящих Условий использования или связанные с ними, будут подаваться исключительно в суды штата или федеральные суды, расположенные в Пенсильвании, и вы настоящим соглашаетесь и подчиняетесь личной юрисдикции таких судов в цели судебного разбирательства любого такого действия.
Настоящие Условия использования применимы к пользователям в США, Канаде и Пуэрто-Рико. Если вы заходите на веб-сайт из-за пределов США, Канады или Пуэрто-Рико, пожалуйста, посетите соответствующий международный веб-сайт, доступный по адресу www.vwr.com, для ознакомления с применимыми условиями. Если вы решите получить доступ к этому веб-сайту из-за пределов указанных юрисдикций, а не использовать доступные международные сайты, вы соглашаетесь с настоящими Условиями использования и тем, что такие условия будут регулироваться и толковаться в соответствии с законами США и штата. Пенсильвании и что мы не делаем никаких заявлений о том, что материалы или услуги на этом веб-сайте подходят или доступны для использования в этих других юрисдикциях.В любом случае все пользователи несут ответственность за соблюдение местных законов.

Общие условия

Настоящие Условия использования, в которые время от времени могут вноситься поправки, представляют собой полное соглашение и понимание между вами и нами, регулирующее использование вами Веб-сайта. Наша неспособность реализовать или обеспечить соблюдение какого-либо права или положения Условий использования не означает отказ от такого права или положения. Если какое-либо положение Условий использования будет признано судом компетентной юрисдикции недействительным, вы, тем не менее, соглашаетесь с тем, что суд должен попытаться реализовать намерения сторон, отраженные в этом положении и других положениях Условия использования остаются в полной силе.Ни ваши деловые отношения, ни поведение между вами и Компанией, ни какая-либо торговая практика не может считаться изменением настоящих Условий использования. Вы соглашаетесь с тем, что независимо от какого-либо закона или закона об обратном, любые претензии или основания для иска, вытекающие из или связанные с использованием Сайта или Условий использования, должны быть поданы в течение одного (1) года после такой претензии или причины. иска возникла или будет навсегда запрещена. Любые права, прямо не предоставленные в настоящем документе, сохраняются за Компанией.Мы можем прекратить ваш доступ или приостановить доступ любого пользователя ко всему сайту или его части без предварительного уведомления за любое поведение, которое мы, по нашему собственному усмотрению, считаем нарушением любого применимого законодательства или наносящим ущерб интересам другого пользователя. , стороннего поставщика, поставщика услуг или нас. Любые вопросы, касающиеся настоящих Условий использования, следует направлять по адресу [email protected].

Жалобы на нарушение авторских прав

Мы уважаем чужую интеллектуальную собственность и просим наших пользователей поступать так же.Если вы считаете, что ваша работа была скопирована и доступна на Сайте способом, который представляет собой нарушение авторских прав, вы можете уведомить нас, предоставив нашему агенту по авторским правам следующую информацию:

электронная или физическая подпись лица, уполномоченного действовать от имени правообладателя;
описание работы, защищенной авторским правом, в отношении которой были нарушены ваши претензии;
идентификация URL-адреса или другого конкретного места на Сайте, где находится материал, который, по вашему мнению, нарушает авторские права;
ваш адрес, номер телефона и адрес электронной почты;
ваше заявление о том, что вы добросовестно полагаете, что спорное использование не разрешено владельцем авторских прав, его агентом или законом; а также
ваше заявление, сделанное под страхом наказания за лжесвидетельство, о том, что приведенная выше информация в вашем уведомлении является точной и что вы являетесь владельцем авторских прав или уполномочены действовать от имени владельца авторских прав.

С нашим агентом для уведомления о жалобах на нарушение авторских прав на Сайте можно связаться по адресу: [email protected].

Одновременная двухфотонная визуализация и двухфотонная оптогенетика корковых цепей в трех измерениях

[Примечание редакции: ответы автора на первый раунд рецензирования приводятся ниже.]

Рецензент № 1:
1) Основная точка:
Новая часть метода не охарактеризована полностью.

Спасибо за критические замечания и предложения по рукописи.В отредактированной рукописи мы представляем дополнительные эксперименты в поддержку новой части наших методов:

1) Мы продемонстрировали одновременную фотостимуляцию 83 клеток в относительно большом объеме коры (480x480x150 мкм, ³) у бодрствующих мышей, используя общую мощность 300 мВт с продолжительностью фотостимуляции 94 мс, при одновременном мониторинге нейронной активности в сеть с GCaMP6f. Мы считаем, что это важный шаг вперед в этой области. Этот результат представлен на Рисунке 3 и Рисунке 3 — дополнении к рисунку 1.

2) В нашей оригинальной рукописи мы обсуждали, что наш гибридный подход к сканированию, который объединяет сканирующие гальванометры с голограммой SLM, требует меньшей мощности, чем другие безсканирующие подходы. Мы не доказали это экспериментально. В доработке мы добавили набор экспериментов для этого сравнения. Мы обнаружили, что наш подход потребовал около половины мощности, чтобы вызвать подобный ответ в нейронах по сравнению с безсканированным подходом. Этот эксперимент подтверждает наше первоначальное утверждение. Этот результат представлен на Рисунке 1 — в приложении 2.

3) Мы также выполнили подробную характеристику перекрестных помех между визуализацией и фотостимуляцией.

а) Визуализация в фотостимуляцию. Мы выполнили электрофизиологические записи и показали, что наши условия визуализации не вызывали значительного увеличения скорости активации клеток по сравнению с «нормальной» спонтанной активностью этих клеток (оба лазера выключены). Этот результат представлен на Рисунке 1 — добавлении к рисунку 4.

б) Фотостимуляция в визуализацию. Мы подробно описали различные стратегии обработки данных для обработки этого перекрестного разговора и думаем, что это имеет практическую ценность для многих читателей.Эти обсуждения можно найти в разделе «Обсуждение» и подразделе «Анализ данных».

4) Мы подробно задокументировали параметры эксперимента для каждого набора данных и статистический анализ, использованный на каждом рисунке.

2) Рисунок 1: Схема микроскопа и количественное определение z-psf на пути фотостимуляции. Важно отметить, что z-psf относительно широк из-за небольшого размера гальванического элемента, они могли бы сделать его более узким (за счет размера поля зрения). Они также характеризуют ошибку наведения и эффективность возбуждения относительно положения в поле зрения.В целом, характеристика пути фотостимуляции является тщательной.
Число спайков в зависимости от мощности стимуляции и продолжительности спирали. Задержка пиков, джиттер и пространственное разрешение сопоставимы с теми, о которых сообщалось в предыдущей работе, в которой использовался тот же метод фотостимуляции (Packer, 2015). Им необходимо предоставить более подробную информацию о том, как было проведено это измерение. Сколько различных пятен вне цели было стимулировано и где они находились? Какая мощность и продолжительность?

1) В предыдущей версии эти данные были представлены для единичного экземпляра (что указано в подписи к рисунку).В ревизии мы добавили больше данных. Общие результаты остаются прежними (Рисунок 1G, Рисунок 1 — приложение к рисунку 3A-B). Эти результаты были получены с помощью электрофизиологии клеток, которые указаны в соответствующих подписях к рисункам.

2) Для пространственного разрешения фотостимуляции мы изменили положение фотостимуляции по сравнению с положением целевой клетки и считали ответ клетки либо с помощью прикрепленной к клетке электрофизиологической записи (Рисунок 1 — приложение к рисунку 3C-D), либо GCaMP6s (Рисунок 1 — приложение к рисунку 3E-F).Эти две серии экспериментов проводятся независимо и показывают похожие результаты. На рис. 1 — приложение к рисунку 3C-F мы добавили вставку, показывающую схемы эксперимента. Кроме того, мы пометили пятна вне цели в C и E, чтобы читатели могли прочитать, сколько и где они находятся на рисунке: для записи электрофизиологии прикрепленных клеток количество пятен вне цели составляло 6 для бокового расстояния, и 10 для осевого расстояния; для записи GCaMP6s это число составило 32 и 10 соответственно.

3) Мы добавили мощность и продолжительность этого эксперимента в подписи к рисунку.В доработке все эти параметры указаны в каждом эксперименте для каждого рисунка, а также в разделе «Материалы и методы».

В измененной рукописи см. Рисунок 1G, рисунок 1 — приложение к рисунку 3. Параметры эксперимента перечислены в конце подписи к каждому рисунку.

В подразделе «Параметры фотостимуляции»:

Частота следования импульсов используемого в эксперименте лазера для фотостимуляции составляет 500 кГц или 1 МГц. […] Эта длительная фотостимуляция состояла из 175 непрерывных спиральных сканирований, каждое длилось ~ 16 мс.

Почему нет количественной оценки возбуждения, вызванного формированием изображения лазером? Они не упоминают мощность, используемую для визуализации; в обсуждении они заявляют, что они сохраняли мощность изображения «как можно более низкой».

Мощность лазера, используемая для получения изображений методом резонансного сканирования, обычно была ниже 50 мВт и могла достигать 80 мВт для слоев глубже ~ 250 мкм. Мы добавили эту информацию в разделы «Обсуждение» и «Материалы и методы».

Кроме того, мы выполнили электрофизиологическую запись и показали, что наши условия визуализации не вызывали значительного увеличения скорости активации клеток по сравнению с «чистой» спонтанной активностью (все лазеры выключены).Это показано на Рисунке 1 — добавлении к рисунку 4.

В отредактированной рукописи см. Рисунок 1 — приложение к рисунку 4 и в подразделе «Конструкция микроскопа»:

«Типичная мощность формирования изображения составляет <50 мВт и может достигать 80 мВт для слоев глубже ~ 250 мкм».

Почему используются спирали такой большой длительности (до 400 мс)? Возбуждение максимизируется, когда продолжительность спирали намного меньше постоянной времени выключения канала (40 мс для C1V1).

Мы согласны с рецензентом в том, что продолжительность спирали должна быть короче, чтобы уменьшить задержку, дрожание и увеличить возбудимость, как показано в характеристике на Рисунке 1G и Рисунке 1 — приложение к рисунку 3A-B.В зависимости от цели экспериментов использовали разную длительность спиралей:

1) Рисунок 2 и Рисунок 2 — дополнение к рисунку 1. Для имитации наихудшего состояния фотостимуляции использовалась большая продолжительность спирали. Мы исследовали надежность активации и неспецифический эффект активации.

2) Рисунок 3, где показана одновременная фотостимуляция на большом количестве клеток (> = 50). Мы использовали нормальное условие сканирования по короткой спирали. Общее время фотостимуляции составило ~ 94 мс, при этом было выполнено 5 непрерывных спиральных сканирований, каждое продолжительностью ~ 18.85 мс.

3) Рисунок 4, где показана фотостимуляция клеток ПОВ при визуальных стимулах. Общая продолжительность визуальных стимулов составляла 2 секунды, а общее время фотостимуляции составляло 2,8 секунды, что содержало 175 непрерывных спиральных сканирований, каждое продолжительностью ~ 16 мс.

Мы зафиксировали это в соответствующих подписях к рисункам, а также в подразделе «Параметры фотостимуляции».

В подразделе «Параметры фотостимуляции»:

«Частота следования импульсов используемого в эксперименте лазера для фотостимуляции составляет 500 кГц или 1 МГц.[…] Эта длительная фотостимуляция состояла из 175 непрерывных спиральных сканирований, каждое длилось ~ 16 мс ».

3) Рисунок 2: Они иллюстрируют, как было показано в предыдущей работе, что нейроны, на которые нацелены, надежно возбуждаются. Карта выделяет эффекты широкого z-psf. Было бы неплохо посмотреть, смогут ли они эффективно возбуждать целевые нейроны с меньшей мощностью или длительностью, улучшая при этом пространственное разрешение.

Спасибо за предложения. На этом рисунке показана активация одного нейрона в трехмерном пространстве.Мы переместили этот рисунок в приложение, как на Рисунок 2 — рисунок в приложении 1. PSF нашей системы фотостимуляции составляет около 14,5 мкм на FWHM (Рисунок 1D). Это переводится в ~ 40 мкм FWHM для фактической фотостимуляции (рисунок 1 — приложение к рисунку 3), что подтверждается записью с использованием как электрофизиологии (рисунок 1 — приложение к рисунку 3C-D), так и визуализации кальция (рисунок 1 — приложение к рисунку 3E-F). . Этот результат был аналогичен результату на рис. 2 — приложение к рисунку 1, но с несколько иной точки зрения (неспецифическая фотостимуляция).В этих трех сериях независимых экспериментов мощность и продолжительность фотостимуляции указаны ниже:

Хотя параметр фотостимуляции довольно сильно варьировался (особенно для рисунка 2 — приложение к рисунку 1, где имитировали худшие условия фотостимуляции), ситуация для аксиального разрешения и неспецифической фотостимуляции выглядела схожей. Пока мы работаем над заменой гальво, мы думаем, что луч фотостимуляции может поразить дендритные ветви от других клеток, которые проходят через область фотостимуляции.Это было ясно видно в оригинальных срезах из нашей лаборатории в Packer et al., 2012. Это могло играть важную роль в неспецифической фотостимуляции. Соматически ограниченные опсины, вероятно, помогут, и на самом деле было показано, что они улучшают разрешение (Baker et al., 2016). Мы отмечаем, что это не имеет ничего общего с базовой оптической технологией, а с молекулярной биологией, и мы ожидаем, что наша система будет иметь аналогичные улучшения, сохраняя при этом свою уникальную и мощную способность нацеливания на большие объемы.Мы работаем над получением этих конструкций и вирусов в нашей лаборатории, и мы признали, что улучшение galvo и применение будущего соматически ограниченного опсина поможет в подразделе «Неспецифическая фотостимуляция».

В подразделе «Неспецифическая фотостимуляция»:

«В нашем текущем наборе экспериментов мы используем пучок с относительно низкой числовой апертурой возбуждения (~ 0,35), который ограничен небольшим размером зеркала (3 мм) гальванометрических сканеров после SLM. […] Недавно сообщалось о соматически ограниченном канале родопсина 2 (Baker et al., 2016), и показали сниженную, но не устраненную активацию нецелевых клеток in vitro ».

4) Рисунок 3: Новинка заключается в возможности одновременной стимуляции «большого» количества нейронов. Эта способность продемонстрирована лишь анекдотично в эксперименте, в котором они одновременно стимулируют 27 нейронов. Похоже, что эффективность не сильно падает с 15 целевых нейронов до 27 целевых нейронов. Можно ли было стимулировать больше? Могут ли они перейти от 70% активации для группы из 27 нейронов к 100% путем изменения параметров стимуляции (т.е. мощность, продолжительность, количество спиралей)? Абсолютно необходима более точная характеристика границ метода.

Спасибо за критические замечания. В обновленной версии этот рисунок 3 был перемещен на рисунок 2. Мы провели дополнительные эксперименты и представили их на новом рисунке 3 и рисунке 3 — добавлении к рисунку 1. На рисунке 3 общее количество одновременных клеток-мишеней составляет 40, 43 и 83 На рисунке 3 — приложение к рисунку 1, общее количество одновременных клеток-мишеней равно 50.Исключая клетки, которые никогда не реагируют на все протестированные образцы фотостимуляции, общая скорость ответа ансамбля (количество реагирующих клеток / количество клеток-мишеней) составила 78% ± 7%, что немного хуже, чем 82% ± 9%, представленных на рисунке. 2 (от 3 до 27 одновременных клеток-мишеней).

В этой новой серии экспериментов мощность фотостимуляции составляла 3,6 ~ 4,8 мВт / ячейка, а время фотостимуляции составляло 94 мс, что включало 5 непрерывных полных спиральных сканирований, каждое продолжительностью 18,85 мс. В частности, общая мощность для корпуса из 83 ячеек составила 300 мВт.Уменьшение времени фотостимуляции снизило скорость отклика ансамбля (данные не показаны). Хотя можно было бы увеличить мощность и продолжительность фотостимуляции, чтобы увеличить количество клеток-мишеней, а также скорость реакции ансамбля, мы сочли, что лучше ограничить общую мощность значениями, которые, как было показано, не вызывают теплового повреждения при постоянном освещении. .

Что касается клеточных «сбоев», возможно, что когда нацелено большое количество пирамидных клеток, они также могут активировать интернейроны, которые в свою очередь могут подавить эти пирамидные клетки.Сетевая динамика ставит вопрос о том, может ли быть достигнута 100% -ная скорость активации, и это может стать предметом будущих исследований. Для проверки этих гипотез потребуются обширные электрофизиологические исследования и контроль, и мы полагаем, что это выходит далеко за рамки данной статьи.

В отредактированной рукописи см. Рисунок 3, рисунок 3 — приложение 1.

Раздел результатов:

«Желательна система, которая может модулировать относительно большие пулы нейронов. С помощью лазера с низкой частотой повторения и стратегии гибридного сканирования (обсуждение) лазерный луч может быть сильно пространственно мультиплексирован для адресации большого количества ячеек при сохранении низкой средней мощности.[…] Неспецифическая фотоактивация усиливается для тех клеток, которые окружены клетками-мишенями, но в целом она была ограничена в пределах 20 мкм от ближайшей клетки-мишени (рис. 3F) ».

5) Рисунок 4: Чтобы сделать этот эксперимент более интересным, было бы неплохо продемонстрировать результат, который не может быть достигнут менее сложными методами, такими как однофотонная стимуляция. Одним из таких примеров было бы показать, как изменение селективности в популяции зависит от конкретных нейронов SOM, которые были стимулированы.Что произойдет, если стимулировать другую группу нейронов ПОВ?

Спасибо за предложения. На рисунке 4 мы одновременно фотостимулировали 9 клеток ПОВ, которые имеют гораздо лучшую пространственную специфичность, чем типичная однофотонная стимуляция. Мы согласны с тем, что было бы неплохо показать, как сеть реагирует на стимуляцию различных групп ячеек SOM.

Действительно, мы над этим работаем. Из-за того, что животные SOM-cre стали недоступны, мы отложили этот расширенный эксперимент как будущую работу, посвященную самому исследованию нейробиологии.

Рецензент № 2:
Как утверждают авторы в разделе «Обсуждение»: «стало нормой использовать голографические подходы» для стимуляции 2P одного или нескольких нейронов, экспрессирующих опсин. Центральным достижением этой статьи является использование сканирующих гальванических аппаратов в сочетании с бимлетами, производимыми системой SLM без сканирования для оптогенетической стимуляции. Авторы утверждают, что это значительно снижает мощность, необходимую для фотостимуляции нейронов по сравнению с другими методами трехмерной голографии, что позволяет дополнительно мультиплексировать пучок и стимулировать большее количество нейронов.К сожалению, это утверждение не подтверждается экспериментально авторами нигде в представленной рукописи. Рукопись страдает недостатком строгости, необходимой для продвижения вперед, и написана плохо.

Спасибо за критические замечания и предложения по рукописи. В отредактированной рукописи мы представили дополнительные эксперименты в поддержку аргумента о том, что гибридная стратегия сканирования требует меньше энергии, чем безсканированный подход. Мы обнаружили, что наш подход потребовал около половины мощности, чтобы вызвать подобный ответ в нейронах по сравнению с безсканированным подходом.

Кроме того, мы продемонстрировали одновременную фотостимуляцию 83 клеток в относительно большом объеме коры (480x480x150 мкм ³) у бодрствующих мышей, используя общую мощность 300 мВт с продолжительностью фотостимуляции 94 мс, при одновременном мониторинге нервной активности сеть с GCaMP6f. Мы считаем, что это важный шаг вперед в этой области.

В целом, мы утверждаем, что мы расширяем полностью оптический метод (одновременная визуализация и фотостимуляция) с 2D на 3D, имея при этом возможность стимулировать относительно большое количество клеток у мышей in vivo.Насколько нам известно, это первый отчет о двухфотонной фотостимуляции такой большой группы клеток в 3D (83 клетки в диапазоне глубин 150 мкм).

1) Проверьте центральное утверждение статьи: установка микроскопа должна иметь возможность переключаться между безсканированной трехмерной голографией и гибридным методом голографической-гальвоспиральной стимуляции, который, по утверждению авторов, значительно снижает мощность света, необходимую для стимуляции. Оба метода стимуляции можно использовать на одном и том же животном с помощью одного и того же малоповторного лазера.Это могло бы элегантно контролировать аппаратную изменчивость и вариабельность от животного к животному (особенно уровень экспрессии опсина). Пожалуйста, продемонстрируйте, что доза света, необходимая для стимуляции нейронов, либо с помощью считывания GCaMP, либо с помощью записей электрофизиологии с привязкой к клеткам (последнее было бы лучше), намного меньше для гибридного подхода по сравнению с голографией без сканирования. Я заметил, что время стимуляции для спиральной стимуляции довольно велико (раздел «Материалы и методы» имеет большой диапазон 10-2800 мс), поэтому не забудьте сопоставить время стимуляции, а также мощность, чтобы сравнить дозировку света с дозировкой.возбудимость. На мой взгляд, этот набор экспериментов необходим для рассмотрения рукописи для публикации.

Спасибо за критические замечания и предложения. В отредактированной рукописи мы представляем серию экспериментов для сравнения требований к мощности для спирального сканирования и безсканированного подхода с использованием чистой голограммы. Мы провели эксперименты на 9 клетках над 2 мышами in vivo. Для каждой клетки мы сравнили вызванную ΔF / F из 3 условий: (1) Спиральное сканирование при 5 мВт, длительность стимуляции 20 мс (2) Диск без сканирования при 5 мВт, длительность стимуляции 20 мс (3) Диск без сканирования при 9 мВт, Длительность стимуляции 20 мс.

Спиральный узор и диск покрывают все тело клетки, как правило, диаметром ~ 12 мкм.

С помощью одностороннего теста ANOVA мы обнаружили, что вызванный ответ ΔF / F имеет значительную разницу между условием (1), (2) и условием (2), (3). Условие (1) имеет тенденцию к увеличению ΔF / F, чем условие (3), но незначительно. Таким образом, мы утверждаем, что для достижения аналогичного отклика в тех же ячейках в подходе гибридного сканирования потребовалось около половины мощности, чем в подходе с чистой голограммой без сканирования.Этот набор данных представлен на рисунке 1 — приложение к рисунку 2.

Кроме того, мы хотим обратиться к большому диапазону времени стимуляции. В этой рукописи используются три диапазона времени фотостимуляции: (1) Рисунок 2 и Рисунок 2 — дополнение к рисунку 1. Большая продолжительность спирали (> 400 мс, но менее 1 секунды) использовалась для имитации наихудшего состояния фотостимуляции. Мы исследовали надежность активации и неспецифический эффект активации. (2) Рисунок 3, где мы показываем одновременную фотостимуляцию на большом количестве клеток (> = 50).Мы использовали нормальное условие сканирования по короткой спирали. Общее время фотостимуляции составило ~ 94 мс, что включало 5 непрерывных спиральных сканирований длительностью ~ 18,85 мс каждое. (3) Рисунок 4, где мы демонстрируем фотостимуляцию клеток ПОВ во время визуальных стимулов. Общая продолжительность визуальных стимулов составляла 2 секунды, а общее время фотостимуляции составляло 2,8 секунды, что содержало 175 непрерывных спиральных сканирований, каждое продолжительностью ~ 16 мс.

В отредактированной рукописи см. Рисунок 1 — дополнение к рисунку 2 и подраздел «Обоснование нашего дизайна: минимизация мощности лазера»:

«Независимо от точной реализации, подходы без сканирования требуют большей мощности лазера на ячейку в целом. Для получения чистой голограммы требуется примерно вдвое больше мощности по сравнению с нашей гибридной стратегией для достижения аналогичного ответа в тех же клетках (Рисунок 1 — рисунок в приложении 2). Скорее всего, для такого же возбуждения с временной фокусировкой потребуется больше мощности, поскольку более жесткое осевое ограничение будет меньше возбуждать мембрану.”

В подразделе «Параметры фотостимуляции»:

«Частота следования импульсов используемого в эксперименте лазера для фотостимуляции составляет 500 кГц или 1 МГц. […] Эта длительная фотостимуляция состояла из 175 непрерывных спиральных сканирований, каждое длилось ~ 16 мс ».

2) Вот уже несколько лет люди публикуют одновременную визуализацию 2P и стимуляцию GCaMP и C1V1. Авторы сообщают в разделе «Результаты» «минимальные перекрестные помехи между лучами визуализации и фотостимуляции» без описания.Если этот метод станет основным, жизненно важно, чтобы оптические и электрические перекрестные помехи были хорошо охарактеризованы с использованием этих реагентов. Это жизненно важно для прогресса в этой области:

a) Авторы используют записи с привязкой к ячейкам для измерения латентности и дрожания их парадигмы стимуляции, поэтому они хорошо знакомы с электрофизиологией in vivo . Пожалуйста, измерьте нарушения клеточной активности (прикрепленные клетки) и мембранного потенциала (целая клетка) экспрессирующих C1V1 клеток при 2P-сканировании с типичными условиями для визуализации GCaMP.Пожалуйста, убедитесь, что записанные клетки C1V1 также отвечают на парадигму стимуляции, чтобы подтвердить подходящие уровни экспрессии.

Мы выполнили присоединенную к клетке электрофизиологическую запись на экспрессирующих C1V1 клетках, когда визуализирующий лазер сканировал по плоскости, где расположена клетка, при различных условиях мощности. Мы подтвердили, что зарегистрированные клетки реагировали на фотостимуляцию как до, так и после этого эксперимента. Односторонний тест ANOVA не показывает значительной разницы в скорости активации ячейки между условиями 0 мВт и 35 ~ 90 мВт.Наша типичная мощность изображения была ниже 50 мВт, хотя она могла достигать 80 мВт для слоев глубже ~ 250 мкм. Кроме того, сканирование лазера формирования изображения циклически проходит через разные плоскости формирования изображения (обычно разделенные на ~ 50 мкм каждая), что приводит к 3 ~ 4-кратному снижению мощности, передаваемой в одну и ту же плоскость. Это измерение показывает, что влияние визуализирующего лазера на скорость воспламенения клеток в нашем полностью оптическом эксперименте практически незначительно. Это показано на Рисунке 1 — добавлении к рисунку 4. Обратите внимание, что этот результат более или менее соответствует результатам, о которых сообщалось ранее в Rickgauer et al., (2014) и Пакер и др., (2015).

Мы не проводили запись всей клетки. Несомненно, что активация опсина вызывает подпороговую деполяризацию в некоторых клетках, и мы это утверждаем. Что касается «срабатывания» * и получения значимого выходного сигнала, который будет стимулировать сетевую активность, мы не видим значительного эффекта от использования наших типичных оптических мощностей для построения изображений. Поскольку в центре внимания этой статьи находится весь оптический опрос, а фактическим стандартом оптического мониторинга является визуализация кальция, мы используем их установленные метрики переходных процессов флуоресценции, чтобы сообщить о нейронной активности.Эти переходные процессы обычно являются индикаторами потенциалов действия, а не подпороговыми сигналами, и мы использовали привязанную к ячейке частоту всплесков, чтобы охарактеризовать основную истинность этих сигналов. Мы считаем, что это хорошо согласовано и согласуется с большинством исследований изображений и фотостимуляции.

В отредактированной рукописи см. Рисунок 1 — приложение 4 к рисунку и подраздел «Минимизация перекрестных помех между визуализацией и фотостимуляцией»:

«Запись электрофизиологии клеток показывает, что частота возбуждения нейронов имеет тенденцию к увеличению по мере увеличения мощности визуализирующего лазера.Тем не менее, мы отмечаем, что нет существенной разницы в скорости стрельбы в наших типичных условиях объемного изображения (Рисунок 1 — рисунок в приложении 4), где мощность лазера обычно была ниже 50 мВт и могла достигать 80 мВт для слоев глубже ~ 250 мкм. Тем не менее, по мере того, как красные индикаторы продолжают улучшаться, мы можем снова увидеть в будущем переключение на «синие» опсины, поскольку спектральное перекрытие между опсином и индикатором может быть уменьшено ».

б) Авторы показывают пример оптического перекрестного взаимодействия пучка стимуляции опсина во время визуализации GCaMP (Рисунок 1 — рисунок в приложении 3) и их программное решение.Предоставьте количественную оценку того, насколько большими обычно бывают артефакты и насколько хорошо их удаляет обработка данных. Один эксперимент, который следует включить, должен был бы стимулировать клетки мыши только с помощью GCaMP (без C1V1) и измерить, какой процент клеток после реализации конвейера обработки данных все еще характеризуется как стимулированные критериями активации, записанными в методах. Это даст представление о ложных срабатываниях.

Перекрестные помехи от стимуляции опсином к визуализации характеризовались как резкое увеличение флуоресценции, а затем резкое снижение (Рисунок 1 — Приложение 5 к рисунку), что полностью отличается от динамики переходного процесса кальция.Этот перекрестный ток (артефакт флуоресценции) можно четко идентифицировать при ручном осмотре.

В новой версии мы предлагаем различные стратегии для устранения перекрестных помех, в зависимости от реальной ситуации:

1) Базовый уровень GCaMP6 слабый, а артефакт флуоресценции слабый. Это не повлияет на анализ, поэтому дополнительная обработка данных не требуется. Это относится к рисунку 2 и рисунку 2 — дополнению к рисунку 1.

2) Артефакт флуоресценции сильный. В типичных условиях эксплуатации продолжительность фотостимуляции непродолжительна.Если флуоресцентный артефакт появляется только в пределах 1 кадра данных для всей плоскости визуализации, мы удаляем этот кадр с незначительной потерей данных. Так обстоит дело с рисунком 3.

3) Артефакт флуоресценции сильный, а продолжительность фотостимуляции большая. Мы приступили к обработке данных для удаления артефакта, как описано в исходной рукописи. Так обстоит дело с рисунком 4. Мы добавили дополнительные панели с рисунками к рисунку 1 — дополнение к рисунку 5, которое описывает эффект от этой обработки данных.Мы также количественно оценили эффект подавления артефактов. Мы проанализировали необработанный ΔF / F клеток (экспрессируемых только с GCaMP6, но не с C1V1) непосредственно перед фотостимуляцией и сразу после начала фотостимуляции. При использовании процедуры подавления артефактов общее исходное значение ΔF / F для разных клеток остается одинаковым до фотостимуляции и сразу после начала фотостимуляции, хотя стандартное отклонение последнего больше. Тем не менее, извлеченные события между этими двумя периодами остаются схожими.Это показано на рисунке 1 — приложение к рисунку 5D-E. Это показывает эффективность нашего метода.

Наконец, может помочь ограниченный алгоритм неотрицательной матричной факторизации, используемый для извлечения сигнала флуоресценции, поскольку он может идентифицировать артефакт флуоресценции как часть фона и подавлять его из сигнала.

При всех этих процедурах артефакты не видны на извлеченных следах флуоресценции на рис. 2 ~ 4. Все вышеперечисленное описано в подразделе «Минимизация перекрестных помех между визуализацией и фотостимуляцией».

Размер артефакта во многом зависит от уровня экспрессии GCaMP6 (примечание: не C1V1). При большом количестве целевых ячеек артефакт может привести к насыщению ФЭУ. Вышеупомянутая стратегия представляет собой общее руководство. Что касается того, какой вариант выбрать, всегда следует проверять извлеченные следы флуоресценции (по среднему значению триггера фотостимуляции), чтобы определить, есть ли остатки артефактов и повлияет ли это на последующий анализ данных. Хотя описанные выше процедуры могут подавить артефакты в целом, стробируемый ФЭУ, который может отключаться по прибытии лазерного импульса фотостимуляции, может значительно помочь, поскольку потенциально может способствовать более объективному анализу.Внедрение этого оборудования в настоящее время продолжается.

В отредактированной рукописи см. Рисунок 1 — приложение к рисунку 5 и подраздел «Минимизация перекрестных помех между визуализацией и фотостимуляцией»:

«Второй тип перекрестных помех влияет на высокоточную запись нейронной активности и вызван флуоресценцией (или другими помехами), генерируемой непосредственно фотостимулирующим лазером, что может вызвать фоновый артефакт при записи сигнала кальция во время фотостимуляции.[…] При всех этих процедурах артефакты фотостимуляции не видны на извлеченном графике флуоресценции на рис. 2 ~ 4 ».

3) В разделе «Результаты» авторы сообщают, что «скорость ответа отдельных целевых клеток оставалась высокой и стабильной (Рисунок 3F, 82% + — 9%). В группе клеток, которые одновременно подвергались фотостимуляции, процент реагирующих клеток также был стабильно (Рисунок 3G, 82% + — 9%) ».
а) Я не понимаю рис. 3F. Представленные условия стимула идут от 1-27 целей.Ось Y показывает частоту ответа отдельных целевых ячеек. Я полагаю, что этот график показывает количество ячеек, которые реагировали на каждое из этих условий, но это похоже на то, что показано на рисунке 3G. Показывает ли этот график возбуждение каждой клетки по очереди во всех условиях (например, проходя через каждый из 27 нейронов в состоянии 7)? Если да, то каково значение этого графика? Рисунок 3G имеет для меня гораздо больше смысла.
b) Рисунок 3F и 3G имеют очень разные распределения в зависимости от условий стимуляции, поэтому мне трудно поверить, что указанный процент (82% + — 9%) идентичен для обоих графиков.

Приносим извинения за эту путаницу. Мы объясним разницу в следующем обсуждении. Обратите внимание, что в обновленной версии этот рисунок был перемещен как рисунок 2.

1) На рисунке 2F мы охарактеризовали скорость ответа отдельных целевых клеток. Несколько ячеек могли быть нацелены вместе как ансамбль, но нас интересовала скорость ответа в каждой отдельной ячейке (усредненная по испытаниям) в целевом ансамбле.

2) На рисунке 2G нас интересовала скорость ответа от испытания к испытанию на уровне ансамбля, т.е.е. отношение количества реагирующих клеток к общему количеству клеток-мишеней в ансамбле.

Для ясности мы обозначили «частоту ответа на уровне отдельной клетки» для рисунка 2F и «скорость ответа на уровне ансамбля» для рисунка 2G. Эти два графика характеризуют разные аспекты надежности фотостимуляции. Среднее и стандартное отклонение для условий 1 и 2 одинаковы на обоих графиках, поскольку в целевом ансамбле есть только одна целевая ячейка. При условии, что размер выборки достаточно велик, общее среднее значение и стандартное отклонение должны быть очень похожими для каждого условия.Это объясняет, почему скорость ответа как на уровне отдельных клеток, так и на уровне ансамбля составляет 82% ± 9%. Мы специально изменили формулировку в рукописи и заявили, что оба ответа составляют 82% ± 9%, чтобы избежать возможной путаницы. Различное распределение на этих двух графиках объясняется тем фактом, что скорость ответа для каждой ячейки на рисунке 2F была усреднена по испытаниям, и мы построили график распределения по разным ячейкам. На рисунке 2G каждый образец взят из испытания; поэтому в условиях 1 и 2 были подсчеты на уровне 0%.Эти различия мы указали в подписи к рисунку.

В отредактированной рукописи см. Рис. 2 F-G и раздел результатов:

«Мы дополнительно исследовали надежность фотоактивации, а также ее влияние на активацию нецелевых клеток, то есть клеток в пределах поля зрения, которые явно не нацелены с помощью бимлета. Мы выполнили от 8 до 11 испытаний для каждой схемы стимуляции. Клетки, не отвечающие на фотостимуляцию ни при каких условиях, были исключены из этого анализа (см. Раздел «Материалы и методы»).Мы характеризуем скорость ответа на двух уровнях: отдельная ячейка (рисунок 2F) и ансамбль (рисунок 2G). Первый характеризует скорость ответа отдельных клеток-мишеней в любом паттерне стимуляции, а второй характеризует процент реагирующих клеток в целевом ансамбле (определяемый здесь как скорость ответа ансамбля). По мере увеличения M скорость ответа как на уровне отдельных клеток, так и на уровне ансамбля остается высокой (оба составляют 82% ± 9% для всех 7 условий стимуляции).”

c) Я не согласен с оценкой, что процент реагирующих клеток стабильный. Пики гистограммы обычно уменьшаются при дальнейшем мультиплексировании луча. Я бы исключил это утверждение.

В исправленной версии мы исключили это утверждение.

[Примечание редакции: автор откликается на повторную рецензию.]

Рукопись улучшена. Изложение намного яснее, а преимущества и сравнения с предыдущими методами сформулированы лучше.Данные теперь лучше определены количественно. Более подробно описаны методы и добавлены многие ранее пропущенные детали.
Учитывая, что добавление сканирующих зеркал является простой модификацией большинства систем стимуляции на основе SLM, этот метод может быть легко принят во многих лабораториях.

Спасибо за критические замечания и ценные предложения. Мы считаем, что благодаря рассмотрению комментариев и дополнительным экспериментам и анализу качество рукописи улучшилось.

Существенных изменений:
1) Сравнение между сканированием и без сканирования (рис. 1 — приложение к рисунку 2) все еще скудно. Учитывая, что одновременно могут быть нацелены многие клетки, почему этот анализ проводится только для 9 клеток на 2 мышах?

Приносим извинения за путаницу и изменили заголовок и заголовок, чтобы они были понятны. На этом рисунке мы по одной фотостимулируем клетки-мишени. Таким образом, любая неспецифическая фотостимуляция, которая может усиливать возбуждение между клетками, будет в значительной степени сведена к минимуму.Мы считаем, что это чистое сравнение двух подходов. Чтобы было понятно, подпись к рисунку изменена с «Сравнение метода спирального сканирования и безсканированного подхода с использованием чистой голограммы» на «Сравнение метода спирального сканирования и безсканированного (чистого) голографического подхода для фотостимуляции одиночных клеток».

Мы также провели дополнительные эксперименты и добавили больше ячеек. Результаты согласуются с первоначальным экспериментом и подтверждают вывод.Обратите внимание, что мы изменили обозначение этого рисунка на Рисунок 2 — дополнение к рисунку 1.

Кроме того, мы провели дополнительные эксперименты для сравнения этих двух подходов при различной продолжительности фотостимуляции, 20 мс, 10 мс, 5 мс и 1 мс, что отражает диапазон экспериментальных условий. Результаты представлены на новом рисунке 2:

1) Новые сравнения при 20 мс, 10 мс и 5 мс соответствовали исходному результату с длительностью фотостимуляции 20 мс: гибридный подход требует примерно половину мощности лазера, чем безсканирующий подход, чтобы вызвать аналогичный ответ в нейроне.

2) С другой стороны, при продолжительности фотостимуляции 1 мс гибридный подход показывает тенденцию с меньшим бюджетом мощности (но не значимым, p = 0,17 с использованием одностороннего теста ANOVA), чем безсканированный подход.

Мы объяснили этот результат следующим образом.

1) Подход без сканирования использует стратегию пространственного мультиплексирования, при которой двухфотонный свет пространственно распределяется по всему телу клетки; для поддержания эффективности двухфотонного возбуждения (квадрата интенсивности) в пределах зоны покрытия обычно требуется большая общая мощность.Гибридный подход, с другой стороны, представляет собой комбинацию пространственной (в разных ячейках) и временной (в пределах отдельной ячейки) стратегии мультиплексирования. Хотя оптимальная стратегия будет зависеть от фотофизики опсина, опсин обычно имеет длинную константу распада опсина (10 миллисекунд), и это способствует гибридному подходу, потому что каналы опсина могут оставаться открытыми в течение всего (нескольких) спиральных сканирований. Но при очень короткой продолжительности ограниченное количество лазерных импульсов на единицу площади может способствовать снижению эффективности гибридного подхода по сравнению с подходом без сканирования.

2) Мы добавили вышеупомянутое обсуждение в раздел результатов.

В отредактированной рукописи см. Рисунок 2 и рисунок 2 — приложение к рисунку 1.

В результатах, параграф 3:

«По сравнению с альтернативной стратегией без сканирования, такой как временная фокусировка ^11,16,21,22 или чисто голографическими подходами ¹⁵, где мощность лазера распределяется по всему телу клетки каждого целевого нейрона, наш гибридный подход прост, учитывает большое количество одновременных целей и, по-видимому, имеет лучший бюджет мощности для фотостимуляции большой популяции в целом.[…] Но при очень короткой продолжительности ограниченное количество лазерных импульсов на единицу площади может способствовать падению эффективности гибридного подхода по сравнению с подходом без сканирования ».

Рисунок 2 и Рисунок 2 — дополнение к рисунку 1, подпись: «Сравнение метода спирального сканирования и безсканированного (чистого) голографического подхода для фотостимуляции одиночных клеток».

2) Если основная цель этой статьи — максимизировать количество нейронов, активируемых в некотором фиксированном временном окне, важно знать, насколько более быстрые клетки могут быть активированы с использованием безсканированных методов, чем методы сканирования.Если стимуляция без сканирования может активировать клетки значительно быстрее, тогда это может быть более эффективным способом возбудить множество клеток в фиксированном временном окне, чем методы сканирования, представленные здесь.

Спасибо за комментарии. Отметим, что максимальное увеличение общего числа активируемых нейронов является ключевым направлением этой статьи, но не единственным. Полное, независимое, но одновременное 3D-наведение — еще один важный вклад. Что касается этой проблемы, см. Ответ на комментарий 1.Для продолжительности фотостимуляции более 5 мс требуемая мощность для спирального сканирования составляет примерно половину по сравнению с безсканированным подходом, чтобы вызвать аналогичный ответ в нейронах. При продолжительности фотостимуляции 1 мс гибридный подход показывает тенденцию с меньшим бюджетом мощности (но не значимым, p = 0,17 с использованием одностороннего теста ANOVA), чем безсканированный подход, для этого конкретного опсина, но при максимальных уровнях интенсивности на клетку мы не устраивает. В этом случае более высокая частота повторения лазерного излучения может облегчить гибридный подход в этом экстремальном масштабе времени, поскольку будет более эффективное время пребывания на единицу площади ячейки.Полная оптимизация фотостимуляции на очень коротких временных масштабах выходит за рамки этой статьи, и мы считаем, что задержки и низкий джиттер уже очень хороши и намного лучше, чем можно «считывать» с помощью визуализации кальция.

3) Приятно видеть, что активировано большее количество людей, чем в предыдущей версии. Но в чем причина того, что так много клеток не реагируют? Просто они не выражали достаточно C1V1? Это стоит проверить с помощью флуоресценции mCherry и обсудить в тексте.
Добавьте информацию о глубине ячеек в этом анализе.

В наших экспериментах мы не обнаружили четкой корреляции между экспрессией mCherry и возбудимостью C1V1. Это согласуется с результатом, полученным в Packer et al., (2015). Есть клетки, которые экспрессируют mCherry, но не реагируют на фотостимуляцию отдельных клеток. Мы не видим конкретной корреляции между глубиной и возбудимостью.

На рисунке 4, где показана фотостимуляция большой популяции нейронов, мы отмечаем, что клетки, которые могут быть фотоактивированы, когда целевой ансамбль мал, могут не получить фотоактивацию при увеличении размера целевого ансамбля.У нас нет прямых измерений, но мы подозреваем, что когда нацелено большое количество пирамидных клеток, они впоследствии также активируют интернейроны, которые в свою очередь могут подавлять эти пирамидные клетки. Мы также отметили подобный эффект на срезах мозга. Это сетевое взаимодействие — предмет будущих исследований.

Мы отредактировали исправленный документ следующим образом: (Результаты, параграф 6):

«Затем мы стремились смоделировать относительно большие группы нейронов в 3D. Благодаря использованию лазера с низкой частотой повторения и стратегии гибридного сканирования (раздел «Обсуждение») лазерный луч может быть сильно пространственно мультиплексирован для обработки большого количества ячеек при сохранении низкой средней мощности.[…] Мы предполагаем, что это могло быть связано с подавлением прямой связи, поскольку целевые пирамидные нейроны могут активировать локальные интернейроны, которые затем могут подавлять возбуждение соседних клеток. Эти сетевые взаимодействия станут предметом будущих исследований. «

4) Относительно рисунка 1 — дополнение к рисунку 4. Кажется, есть некоторая активация от сканирования при 90 мВт относительно 0 мВт. T-тест должен дать значение p около 0,05. Текст должен адресовать это.

Мы добавили это значение t-критерия в подпись к рисунку.

Мы добавили следующее предложение к рисунку 1 — подпись к приложению 3: «Парный t-критерий между условиями (0 мВт, 35 мВт), (0 мВт, 55 мВт), (0 мВт, 90 мВт) показывает значение ap, равное 0,50, 0,44 и 0,055 соответственно ».

5) Есть несколько относительно простых шагов анализа, которые авторы должны предпринять, чтобы решить вопрос, почему клетки не реагируют во время стимуляции ансамбля. Могут ли клетки, не отвечающие во время ансамблевой стимуляции, стимулироваться сами по себе, или они просто не возбудимы?

Это связано с комментарием 3.При стимуляции большого ансамбля мы специально не выполняли одноклеточную фотостимуляцию для каждой отдельной клетки-мишени. Если клетки не отвечают ни по одному из протестированных паттернов фотостимуляции, мы классифицировали их как «клетки никогда не реагируют», что указано в основном тексте, а также в разделе «Материалы и методы». Это могло быть отсутствие экспрессии C1V1. Как и в ответе в комментарии 3, мы действительно видим, что клетки, которые можно фотоактивировать, когда целевой ансамбль мал, могут не фотоактивироваться, когда размер целевого ансамбля увеличивается.Возможно, что когда нацелено большое количество пирамидных клеток, они также могут активировать интернейроны, которые в свою очередь могут подавить эти пирамидные клетки. Эта сетевая динамика заслуживает дальнейшего изучения и выходит за рамки данной статьи.

https://doi.org/10.7554/eLife.32671.019

Высокоскоростная объемная двухфотонная флуоресцентная визуализация нервно-сосудистой динамики (Журнальная статья)

Фан, Цзян Лан, Ривера, Хосе А., Сун, Вэй, Петерсон, Джон, Хэберле, Генри, Рубин, Сэм и Джи, На. Высокоскоростная объемная двухфотонная флуоресцентная визуализация нервно-сосудистой динамики . Великобритания: Н. п., 2020. Интернет. DOI: 10.1038 / s41467-020-19851-1.

Fan, Jiang Lan, Rivera, Jose A., Sun, Wei, Peterson, John, Haeberle, Henry, Rubin, Sam, & Ji, Na. Высокоскоростная объемная двухфотонная флуоресцентная визуализация нервно-сосудистой динамики .Великобритания. https://doi.org/10.1038/s41467-020-19851-1

Фан, Цзян Лан, Ривера, Хосе А., Сун, Вэй, Петерсон, Джон, Хэберле, Генри, Рубин, Сэм и Цзи, На. Чт. «Высокоскоростная объемная двухфотонная флуоресцентная визуализация нервно-сосудистой динамики». Великобритания. https://doi.org/10.1038/s41467-020-19851-1.

@article {osti_1724291, title = {Высокоскоростная объемная двухфотонная флуоресцентная визуализация нервно-сосудистой динамики}, author = {Фань, Цзян Лан и Ривера, Хосе А.and Sun, Wei and Peterson, John and Haeberle, Henry and Rubin, Sam and Ji, Na}, abstractNote = {Abstract Понимание структуры и функции сосудистой сети в головном мозге требует от нас мониторинга распределенной гемодинамики с высоким пространственным и временным разрешением в трехмерных (3D) объемах in vivo. В настоящее время отсутствует метод объемной визуализации сосудистой сети с субкапиллярным пространственным разрешением и скоростью разрешения кровотока. Здесь, используя двухфотонную лазерную сканирующую микроскопию (TPLSM) с аксиально расширенным фокусом Бесселя, мы фиксируем объемную гемодинамику в мозгу бодрствующей мыши с пространственно-временным разрешением, достаточным для измерения размера капилляров и кровотока.С помощью Bessel TPLSM сигнал флуоресценции сосуда становится пропорциональным его размеру, что позволяет удобно анализировать динамику расширения и сужения сосудов в больших объемах на основе интенсивности. Мы наблюдаем вовлечение вазодилатации и вазоконстрикции с диаметром зрачка и измеряем трехмерный кровоток со скоростью 99 объемов в секунду. Демонстрируя высокопроизводительный мониторинг гемодинамики в бодрствующем мозгу, мы ожидаем, что TPLSM Бесселя окажет широкое влияние на исследования нейрососудистой системы.}, doi = {10.1038 / s41467-020-19851-1}, url = {https://www.osti.gov/biblio/1724291}, journal = {Nature Communications}, issn = {2041-1723}, число = 1, объем = 11, place = {United Kingdom}, год = {2020}, месяц = {11} }